Состав hts 2000: HTS2000 отличие от других припоев

Содержание

HTS2000 отличие от других припоев

На сегодняшний день в интернете появилось очень много припоев для алюминия которые называют аналогом припоя HTS-2000, указывая марку припоя, а в скобках пишут припой HTS-2000, но эти припои с HTS-2000 ничего общего не имеют.

В данной статье мы расскажем Вам об

отличие припоя для алюминия HTS-2000 от других припоев.
Припой HTS-2000 состоит из 9 компонентов и имеет основу Zn(Цинк) , также в состав припоя входит Mg(магний), Al(алюминий),Ag(серебро) и другие компоненты. HTS-2000 считается низкотемпературным припоем и имеет температуру плавления всего 390 гр. С, что значительно ниже чем температура плавления самого алюминия (660 градусов) или алюминиевого сплава. При пайке припоем HTS-2000 не нужно использовать флюс, так как в состав припоя входит компонент, который позволяет HTS-2000 проникать через оксидную пленку алюминия.

Припой HTS-2000 имеет строго определенные параметры прутка: овальное сечение 2,1-2,2 мм, длина 460 мм, характерный серебристый оттенок и блестящую поверхность.

А также обратите внимание, что оригинальный припой HTS-2000 производится только в США и не имеет, и никогда не имел маркировки или клейма.

При любом несоответствии прутка выше перечисленным параметрам- Вы можете быть уверены, что Вам продают подделку под припой для алюминия hts-2000, скорее всего китайского производства.

Припои отечественного производства, который называют аналогом HTS-2000, такой как ПОЦ-80 имеет основу олово, а сам припой состоит всего лишь из 2х компонентов- олово и цинк.
Также аналогом припоя HTS-2000 называют припой 34А, но он состоит из 3х компонентов и имеет основу Al(алюминий), что значительно увеличивает температуру плавления самого припоя. Припой 34А плавится при температуре 530-550 С. и используется только с флюсом.
Припой для алюминия марки Harris состоит из 3х компонентов, имеет более высокую температуру плавления чем HTS-2000 и меньшую текучесть и прочность на разрыв.
Также припой HTS-2000 не является аналогом европейских припоев Castolin, т. к. он имеет другой состав и физические свойства, а также другую температуру плавления.
Вывод:
Нас сегодняшний день припой HTS-2000 не имеет аналогов, т.к. как имеет свой уникальный состав, низкую температуру плавления и физические свойства, отличающиеся от припоев, которые называют аналогом HTS-2000. Единственное что объединяет все эти припои- это только то, что они используются для пайки алюминия.

Оригинальный припой hts-2000 Вы можете купить на нашем сайте.

Припой для пайки алюминия марки HTS-2000 в вопросах и ответах


Припой для пайки алюминия марки HTS-2000 в вопросах и ответах.

Вопрос. Что такое припой HTS-2000?

Ответ. Припой для пайки алюминия второго поколения HTS-2000 представляет собой безфлюсовый пруток длиной 46см и диаметром от 2-2.5мм, созданный американской компанией NTP New Technology Product, лидера в создании безфлюсовых припоев.


Вопрос. Как можно определить подлинность припоя HTS-2000?

Ответ. Припой HTS-2000 имеет характерный серебристый оттенок, блестящий цвет и к тому же все прутки имеют в сечении форму овала. Также все прутки строго одинаковой длины-460мм.


Вопрос. В чем заключается уникальность припоя HTS-2000? 

Ответ. Припой HTS-2000 имеет в своем составе девять компонентов и может растягиваться на 10%, а пленка окисления, которая может находиться на поверхности металла, больше не влияет на качество шва.


Вопрос. Почему припой HTS-2000 лучше других?

Ответ. Другие припои-Alumaloy, Alumarod, Alumaweld, Aladdin и многие другие имеют стержни в которых по 3-4 сплава в основном состоящие из алюминия и цинка. Припой HTS-2000 состоит из 9-ти сплавов, которые включают более дорогие сплавы, которые обеспечивают большую и сильную прочность, удлинение и лучшее проникновение в поры.


Вопрос. Что такое удлинение?

Ответ. Удлинение означает эластичность и оно показывает насколько металл способен сгибаться. Например, припой HTS-2000 под давлением 100000PSI способен изгибаться на 30% прежде чем сломается и это хороший показатель для выдерживания вибраций, нагрузок и стрессов.

Кроме того как правило, чем лучше удлинение, тем выше проникновение примесей.


Вопрос. Какие инструменты и что нужно для пайки алюминия припоем HTS-2000? 

Ответ. Нужно не так много инструментов:металлическая щетка для снятия окисла алюминия, сам пруток HTS-2000, точильный камень, тиски, перчатки и возможно цанговый патрон для зажима самого прутка.


Вопрос. Насколько важно применять металлическую щетку и можно ли обойтись без нее?

Ответ. Без металлической щетки обойтись никак нельзя, она рекомендована производителем припоя HTS-2000, который проверил припой на практике. Более того металлической щеткой не только следует снимать окисел алюминия, но и с ее помощью следует “втирать” припой в места трещин, сколов и в другие поврежденные места деталей или конструкций.


Вопрос. Почему нельзя снимать окисел наждачной бумагой или напильником?

Ответ.  Наждачная бумага имеет с своем составе силикат, который способствует задержке при удалении окисла.


Вопрос. Нужно ли удалять краску с внешней стороны детали?

Ответ. Да, краску следует удалять, чтобы не вдыхать дым. Тем не менее пламя способно заставить краску выгореть, если вы не хотите ее удалять.


Вопрос. А что можно паять припоем HTS-2000? 

Ответ. Припоем для пайки алюминия HTS-2000 можно паять все сплавы алюминия, сплавы цветных металлов, а также смеси магния, никеля, меди, бронзы, титана и все оцинкованные детали.


Вопрос. Можно ли припой HTS-2000 применять на анодированном алюминии?

Ответ. Да, помните, что анодированный алюминий имеет просто покрытие из другого металла над алюминием, который имеет поры, поэтому припой проникает в поры, а затем проникает в алюминий.


Вопрос. Может ли припой HTS-2000 впоследствии подвергаться анодированию или хромированию.

Ответ. Да, после ремонта деталь может быть подвергнута анодированию или хромированию.


Вопрос. Можно ли деталь восстановленную с помощью припоя HTS-2000 подвергать разбуриванию или механической обработке?

Ответ. Да, деталь отремонтированная  припоем HTS-2000 является полностью разбуриваемой или обрабатываемой со стандартными битами.


Вопрос. Какие конкретно сплавы алюминия способен запаять припой HTS-2000?

Ответ. Припоем HTS-2000 можно запаять следующие сплавы алюминия:

  • алюминий-медь (Al-Cu) дуралюмин
  • алюминий-кремний (Al-Si) силумин
  • алюминий-цинк (Al-Zn)
  • алюминий-марганец (Al-Mn)
  • алюминий-магний (Al-Mg)
  • алюминий-магний-кремний (Al-Mg-Si)
  • алюминий-цинк-магний (Al-Zn-Mg) 

Вопрос. А какой примерный расход припоя для пайки алюминия HTS-2000?

Ответ. Припой HTS-2000 достаточно экономичен: расход 1,5 см-2,0 см припоя хватит на 1 см шва.


Вопрос. Почему нельзя припой для пайки алюминия HTS-2000 расплавлять в пламени?

Ответ.  Если расплавленный припой падает на недостаточно разогретую поверхность детали, то он быстро закристаллизовывается и связи между ним и деталью не происходит.


Вопрос.  Что будет если деталь перегреть?

Ответ. Перегрев детали не допускается, так как при этом в шве могут образоваться поры.


Вопрос. Можно ли восстанавливать детали покрытые краской и ржавчиной или загрязненные детали в масле?

Ответ. Да, можно. Формула припоя HTS-2000 второго поколения предусматривает такой вариант.


Вопрос. А можно все таки использовать флюс?

Ответ. Флюс можно все таки применить в случае, если деталь сильно загрязненная.


Вопрос. Что следует использовать при работе с припоем HTS-2000?

Ответ. Пропан следует использовать для деталей толщиной до 10мм. Для большего размера и большей толщины деталей следует применять МАПП газ или кислородно-ацетиленовую горелку. Например, для восстановления литого алюминиевого диска лучше использовать кислородно-ацетиленовую горелку.


Вопрос. Различают высокотемпературную и низкотемпературную пайку. В чем разница между этими двумя терминами.

Ответ. Высокотемпературная пайка подразумевает использование припоя с температурой плавления более 550 градусов по Цельсию (например серебренные, медно-цинковые или медно-фосфоритовые припои). Низкотемпературная пайка подразумевает использование припоя с температурой плавления ниже 550 градусов по Цельсию (например оловянно-свинцовые припои). Таким образом пайка алюминия припоем HTS-2000 считается низкотемпературной пайкой.


Вопрос. При какой температуре начинает расплавляться припой HTS-2000?

Ответ. Припой HTS-2000 плавится при температуре 390 градусов по Цельсию. Процесс плавления припоя должен происходить от контакта с поверхностью детали, нагретой до температуры плавления припоя.


Вопрос. Как следует наносить припой HTS-2000 на спаиваемые детали?

Ответ. Припой должен покрывать место спайки полностью, без пробелов. Не рекомендуется наносить большое количество припоя. чем тоньше слой припоя, тем прочнее соединение. Примечание: нельзя припой для пайки алюминия HTS-2000 держать в самом пламени.


Вопрос. В чем преимущество припоя для пайки алюминия HTS-2000 перед сваркой?

Ответ. Вы не тратите деньги на покупку аргона, катушки припоя, щитки, маски, не тратите на электричество.


Вопрос. Является применение припоя безопасным для пищевых продуктов?

Ответ. Компания NTP не считает алюминий безопасным в плане качества еды, однако по нашему мнению продукт HTS-2000 будет более безопасный, чем например общественная вода. Почему? Водопроводная вода содержит флорид, уран, ртуть и до тысячи других химических веществ и многие люди справедливо считают, что водопроводная вода имеет высокие дозы, чем те с которыми человеческое тело может справиться. Серебро будет гораздо безопаснее, чем продукт HTS-2000, однако серебряный припой не является достаточно сильным в большинстве случаев.


Вопрос. Что такое гальваническая пара?

Ответ. Это недопустимое совмещение разнородных металлов, способствующих к постепенному, но верному их разрушению (коррозии). Вот 6 примеров недопустимых гальванических пар:

1 пара:
1) Алюминий и все сплавы на его основе
2) Медь и её сплавы, серебро, золото, платина, палладий, родий, олово, никель, хром

2 пара:
1) Магниево-алюминиевые сплавы
2) Сталь легированная и нелегированная, хром, никель, медь, свинец, олово, золото, серебро, платина, палладий, родий

3 пара:
1) Цинк и его сплавы
2) Медь и её сплавы, серебро, золото, платина, палладий, родий

4 пара:
1) Сталь нелегированная, олово, свинец, кадмий
2) Медь, серебро, золото, платина, палладий, родий

5 пара:
1) Никель, хром
2) Серебро, золото, платина, палладий, родий

6 пара:
1) Титан и его сплавы
2) Алюминий и его сплавы


Важная информация для желающих приобрести данный продукт. Покупая данный товар, мы  утверждаем, что вы покупаете качественный и надежный товар у регионального дилера от компании NTP через сайт www.info-autoglass.ru.





Припой для пайки алюминия HTS-2000

Как пользоваться припоем HTS-2000

1. Зачищаем и обрабатываем поверхность ремонтируемой детали

Перед началом использования зачистите место пайки с помощью щеточки из нержавейки, которая идет в комплекте. Если вы паяете отломанные части – их лучше обточить с помощью камня или напильника.

2. Предварительно нагреваем поверхность детали и повторно зачищаем

Поднесите горелку к месту пайки и равномерно нагрейте область вокруг него примерно до 200 градусов. Повторите процедуру зачистки поверхности щеточкой из нержавейки. Это делается для уменьшения воздействия оксидной пленки, которая появляется на поверхности алюминия при его нагреве и контакте с кислородом воздуха.

3. Нагреваем поверхность ремонтируемой детали до рабочей температуры пайки

После зачистки поверхности продолжайте равномерно нагревать поверхность алюминия до рабочей температуры пайки (380 -400° C), прикасаясь прутком к поверхности детали, не допуская нагрева самого прутка припоя пламенем. Вы почувствуете, когда наступит нужная температура плавления припоя в момент, когда кончик прутка станет мягким от прикосновения с изделием.

4. Замазываем плавящимся прутком припоя место пайки

После того, как поверхность алюминиевой детали прогрето до температуры плавления припоя можно начинать мазками накладывать расплавленный hts-2000, как бы размазывая его по месту пайки, заполняя тем самым трещины, разломы, место между припаиваемыми изделиями. Не беспокойтесь о внешнем виде – лишнее со шва позже можно будет убрать любым механическим способом.

5. Охлаждаем место пайки

На этом этапе просто дайте изделию остыть естественным способом.

 

6. Убираем лишний припой и обрабатываем шов

При необходимости сохранения внешнего вида изделий, шов и площадь вокруг него можно обработать камнем или напильником, а потом зашлифовать. В результате вы получите алюминиевую поверхность в ее первозданном виде с высочайшими прочностными характеристиками шва.

Советы

  • Будьте внимательны, не обрабатывайте деталь, которое вы будете паять щеткой, напильником, камнем и пр., которые имели контакт с металлом! Это очень важно и при нарушении этого правила качество пайки может значительно ухудшиться.
  • В особо ответственных случаях используйте для зачистки поверхности нержавеющий скребок.
  • Используйте газ пропан для пайки алюминия с толщиной сечения до 10 мм. Для изделий большей толщины стенки используйте ацетилен. Для алюминия от 10 см может потребоваться использование ацетилен – кислород или пропан — кислород.

Алюминиевый припой в Нижнем Новгороде

Алюминиевый припой

   Алюминиевые припои – это коррозионно-стойкие прочные материалы, содержащие в своем химическом составе медь, олово, кремний и другие примеси.

Активно используется для сопряжения алюминиевых деталей и элементов. Обладает отличной капиллярностью, высокой текучестью, офлюсованностью и растяжимостью. Пригоден для ручной и печной пайки. Создает качественную стыковку между деталями.

   Алюминий, под воздействием воздуха и высоких температур, начинает окисляться, что не совсем желательно при выполнении сварных работ. Поэтому, металл предварительно офлюсовывают. Конечный результат пайки всегда получается качественным. Также, алюминий может образовать тройные, четверные или двойные эвтектики вместе с разными химическими элементами.

   Алюминиевые припои имеют максимальную температуру плавления – 600 градусов Цельсия. Их эрозионная активность минимальна, а литейные и механические свойства великолепны. Самые популярные марки, – П590А, Германиевый 2, П575Аф, В 62, Германиевый 1, П124, П550А, силумин, 34А и др. Температура их пайки варьируется в пределах от 500 до 580 градусов Цельсия. Химический состав каждой марки припоя также отличается.

 

    Производство и спецификация 

   Алюминиевые припои содержат многочисленные стальные примеси. Поэтому, каждый из них подбирается в необходимом соотношении и расплавляется в общем температурном тигле. В процессе изготовления жидкую массу тщательно перемешивают. После затвердевания заготовку проверяют на предмет соответствия государственным стандартам и формуют в проволоку, прут, фольгу, порошок или пасту. Спецификация расходного материала:

  • уровень электроспоротивляемости;
  • габаритные размеры;
  • предел прочности на растяжение;
  • температура пайки;
  • температура плавления;
  • плотность;
  • вариант исполнения;
  • твердость;
  • сопротивление на изгиб.

 

    Применение 

  Алюминиевые припои чаще всего используются для соединения деталей из алюминиевых сплавов. Они  нужны в приборостроении, при создании высокоточных нагрузочных механизмов, в бытовых условиях, промышленности и других направлениях.


Условия доставки продукции: “Алюминиевый припой” в Нижнем Новгороде

  • Доставка по Нижегородской области и в другие регионы РФ осуществляется транспортными компаниями на выгодных для заказчика условиях.
  • Доставка в Нижнем Новгороде осуществляется с ближайшего к заказчику склада.
  • Есть возможность самовывоза приобретенной продукции.

Условия реализации в Нижнем Новгороде

  • Компания “Трубное Решение” может поставить оптом и в розницу практически все позиции из каталога.
  • Оплата осуществляется как безналичным способом, так и наличными средствами.
  • Постоянным клиентам можем предложить отсрочку.
  • Если вам нужна металлопродукция нестандартных размеров или редких марок стали, можем организовать производство.
  • Организуем упаковку товара по стандартам.

Гарантии

  • Продукция имеет все необходимые сертификаты.
  • Соответствует нормативным документам.
  • Гарантируем возврат товара в случае обнаружения факта поставки брака.

Новое. Расходные материалы, сменные насадки на интернет-аукционе Au.ru

Безфлюсовый припой универсальный припой второго поколения. Рекомендуется использовать совместно с аппаратами: ЛИГА, ПЛАЗАР, ПЛАЗАРИУМ, МУЛЬТИПЛАЗ, ПЛАЗМА 2007, ГОРЫНЫЧ, ПЛАЗМА Описание # Область применения:
Ремонт и восстановление головок блока цилиндров (трещины, сколы, прогары и т. д)
Ремонт топливных баков выполненных из алюминия
Пайка алюминиевых и медных трубок в различных сочетаниях
Ремонт трубок насосов, комрессоров, кондиционеров
Ремонт днищ лодок выполненных из алюминиевых сплавов
Ремонт картеров автомобилей
Восстановление деталей после износа, поломки, скола
Ремонт алюминиевых корпусов, ремонт радиаторных трубок!

Наплавлавка на посадочных мест подшипников

Возможно восстановление резьбовых отверстий

На этом круг применения припоя HTS 2000 не ограничевается!
Припой HTS 2000 является припоем второго поколения в состав которого входит 9 компонентов.
При нагреве расплавленный припой HTS проникает через пленку оксида алюминия (на поверхности детали) и создает прочные молекулярные связи.
Коррозия для такого соединения не страшна, т.к. электрохимический потенциал между материалом припоя и алюминия невелик.
Такое соединение прослужит не менее 10 лет при эксплуатации в агрессивной среде.
Химический состав определяется как устойчивый, коррозинно стойкий и более прочный нежели при пайке другими припоями.
Пример использования припоя для алюминиевых сплавов HTS-2000
www.youtube.com/watch?v=SRk-5vUDloc

СКАЧАТЬ ИНСТРУКЦИЮ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ ПРУТКА HTS 2000
24weld.ru/products_files/HTS-2000.pdf

Customs Ruling NY 896399 – Тарифная классификация бирок, этикеток, нашивок и пуговиц из Гонконга.

NY 896399

NY 896399

CLA-2-48: S: N: N8: 234-896399

4821.10.2000

4821.10.2000

грн Нэнси yi Zhang
3620 авеню жасмина. , # 203
Лос-Анджелес, California

Re: Тарифная классификация бирок, наклеек, нашивок и кнопок из Гонконга.

Уважаемая г-жа Чжан:

В своем письме без даты, полученном 31 марта 1994 г., вы запросили решение о классификации тарифов.

Были предоставлены образцы, которые будут сохранены для справки: 1. Металлические пуговицы с выгравированными буквами для продажи в США производителям одежды и для использования в качестве средства соединения и крепления. 2. Тканые этикетки для продажи в США производителям одежды и для использования в качестве этикеток на воротнике одежды, а также на других необходимых частях. Сырьем являются полиэфиры.3. Напечатанные этикетки (то же, что и 2. выше, за исключением того, что информация не вплетена в фон ткани, а напечатана на ней.)

4. Кожаные нашивки, которые будут использоваться производителями одежды в качестве декоративных и маркировочных нашивок для джинсы. Материал – натуральная кожа или кожзаменитель.

5. Бирки, предназначенные для продажи в США производителям одежды, прикрепляемые к одежде с указанием марки, цены продажи, материала и т. д.

К металлическим пуговицам применима подсубпозиция 9606.22.0000, Гармонизированная тарифная сетка Соединенных Штатов (HTS), которая предусматривает: Металлические пуговицы из недрагоценных металлов. Ставка пошлины составит 3,6 процента.

Применимой подсубпозицией для тканых этикеток и печатных этикеток (2. и 3. выше) из полиэстера будет 5807.10.1020, которая включает: этикетки, значки и аналогичные изделия из текстильных материалов, в кусках, в полосах или вырезанные по форме или размеру, не вышитые:Тканые:Ярлыки из искусственных волокон.Ставка пошлины составит 9 процентов, а категория текстиля – 669.

Применяемая подсубпозиция для кожаных нашивок будет 4205.00.8000, которая предусматривает: Прочие (помимо некоторых перечисленных) изделия из кожи или композиционной кожи. Ставка пошлины будет Free.

Ярлыки будут классифицироваться в подзаголовке HTS 4821. 10.2000, который включает: Бумажные и картонные этикетки всех видов, напечатанные или не напечатанные: напечатанные полностью или частично литографическим способом.Ставка пошлины составит 8,8 цента за килограмм.

Это постановление вынесено в соответствии с положениями раздела 177 Таможенных правил (19 C.F.R. 177).

Копия этого распоряжения должна быть приложена к ввозным документам, поданным при ввозе данного товара. Если документы были поданы без копии, это постановление должно быть доведено до сведения сотрудника таможни, осуществляющего операцию.

С уважением,

Жан Ф. Магуайр
Региональный директор
Морской порт Нью-Йорка

Пайка металлов: руководство и процессы

Что такое пайка металлов?

Пайка представляет собой группу сварочных процессов, при которых происходит коалесценция материалов путем нагревания до подходящей температуры и использования присадочного металла с температурой ликвидуса выше 840ºF (449ºC) и ниже солидуса основных металлов.

Присадочный металл распределяется между плотно прилегающими поверхностями соединения за счет капиллярного притяжения.

Пайка отличается от пайки тем, что при пайке используется припой с температурой ликвидуса ниже 840ºF (449ºC).

При пайке присадочными металлами из серебряного сплава (серебряная пайка) сплавы имеют температуру ликвидуса выше 840ºF (449ºC).

Пайка

используется только для черных металлов, потому что припой плавится при 960 градусах Цельсия, что выше температуры плавления цветных металлов.

Пайка должна соответствовать каждому из трех критериев:

  1. Детали должны быть соединены без расплавления основных металлов.
  2. Присадочный металл должен иметь температуру ликвидуса выше 840ºF (449ºC).
  3. Присадочный металл должен смачивать поверхности основного металла и втягиваться в соединение или удерживаться в нем за счет капиллярного притяжения.
Здесь тепло применяется ниже соединения, чтобы создать капиллярное действие, которое втягивает присадочный сплав в соединение.

Различия между пайкой и сваркой и пайкой

Пайка – это не то же самое, что сварка пайкой.

Пайка капиллярная, с термическим волочением присадочного металла с использованием капиллярного действия. Капиллярное действие относится к тому, как присадочный металл втягивается в правильно подогнанное соединение. Простым примером является то, как вода прилипает к соломинке и вытягивается вверх против внешних сил, таких как гравитация.

Сварка пайкой  перекрывает зазор с помощью присадочного металла, который расплавляется и осаждается в галтелях и канавках точно в тех точках, где он будет использоваться. При сварке твердым припоем может происходить ограниченное плавление основного металла.

Пайка — это процесс соединения материалов с присадочным металлом, температура ликвидуса которого не превышает 842ºF (450ºC). Как и при пайке, присадочный металл проникает в соединение под действием капиллярных сил.

Для получения хорошего соединения с использованием любого из различных процессов пайки детали должны быть должным образом очищены и защищены либо флюсом, либо атмосферой во время нагрева, чтобы предотвратить чрезмерное окисление.

Детали должны обеспечивать капилляр для присадочного металла при правильном выравнивании, и должен быть выбран процесс нагрева, обеспечивающий надлежащую температуру пайки и распределение тепла.

Принципы

Капиллярный поток является наиболее важным физическим принципом, обеспечивающим хорошую пайку, обеспечивающую расплавление присадочного металла на обеих соприкасающихся поверхностях.

Соединение также должно быть правильно расположено, чтобы обеспечить эффективное капиллярное действие и, как следствие, коалесценцию. В частности, капиллярность является результатом поверхностного натяжения между основным металлом (металлами), присадочным металлом, флюсом или атмосферой, а также контактным углом между основным и присадочным металлами.

На практике на характеристики текучести припоя также влияют соображения, связанные с текучестью, вязкостью, давлением паров, силой тяжести и эффектами любых металлургических реакций между припоем и основными металлами.

Паяное соединение, как правило, имеет относительно большую площадь и очень небольшую толщину. В самом простом применении процесса соединяемые поверхности очищаются от загрязнений и оксидов. Затем их покрывают флюсом или материалом, способным растворять присутствующие твердые оксиды металлов и предотвращать новое окисление. Затем область соединения нагревается до тех пор, пока флюс не расплавится и не очистит основные металлы, которые защищены от дальнейшего окисления слоем жидкого флюса.

Затем припой

расплавляется в какой-то точке на поверхности зоны соединения.Капиллярное притяжение между основным металлом и присадочным металлом намного выше, чем между основным металлом и флюсом. Поэтому флюс удаляется присадочным металлом. Шов после охлаждения до комнатной температуры будет заполнен твердым присадочным металлом. Твердый флюс будет находиться на поверхности соединения.

Высокая текучесть является желательной характеристикой твердого припоя, поскольку капиллярного притяжения может быть недостаточно, чтобы заставить вязкий присадочный металл попасть в плотно прилегающие соединения.

Пайка иногда выполняется с активным газом, таким как водород, или в инертном газе, или в вакууме.Атмосферная пайка исключает необходимость последующей очистки и обеспечивает отсутствие остатков коррозионно-активного минерального флюса. Углеродистые стали, нержавеющие стали и детали из суперсплавов широко обрабатываются в атмосфере прореагировавших газов, сухого водорода, диссоциированного аммиака, аргона и вакуума. Большие вакуумные печи используются для пайки циркония, титана, нержавеющей стали и тугоплавких металлов. При правильном технологическом процессе алюминиевые сплавы также могут быть подвергнуты пайке в вакуумной печи с отличными результатами.

Пайка является предпочтительным процессом для получения высокопрочных металлургических соединений и сохранения необходимых свойств основного металла, поскольку он является экономичным.

Гладкие соединения, созданные с помощью угловой пайки поверх ацетиленовой сварки для велосипедной рамы

Советы

1: обеспечить правильный зазор в стыке

Два соединяемых металла должны иметь плотную и оптимальную посадку, чтобы обеспечить втягивание капиллярного действия припоя. Инженер рассчитывает правильное количество посадок, чтобы максимизировать прочность в соответствии с таблицей ниже.

Рекомендуемый зазор при пайке при температурах пайки

Группа AWS Идеальный зазор
БАЛСИ – 0.000-0,002″ (0,000-0,051 мм) для пайки в печи в вакууме и плакированного листового припоя в соляной ванне 0,008–0,010″ (0,203–0,254 мм) для длины напуска более 0,250″ (6,35 мм)
БЦУП – 0,001–0,005″ (0,025–0,127 мм) без флюса и для флюсовой пайки швов длиной менее 1″ (25,4 мм)
МЕШОК – 0,002-0,005″ (0,051-0,127 мм) флюсовая пайка
– 0. Пайка в атмосфере 000–0,002″ (0,000–0,051 мм)
BCu – 0,000-0,002″ (0,000-0,051 мм) атмосферная пайка
BCuZn – флюсовая пайка 0,002-0,005″ (0,051-0,127 мм)

2: Очистка перед пайкой

Загрязнения на поверхности металла могут препятствовать капиллярному процессу для присадочного металла. Это снизит прочность свариваемого соединения. Могут использоваться химические и механические процессы очистки.

Химическая

  • нефтяной спрей
  • хлорированные растворители
  • паровое обезжиривание
  • эмульсионный спрей
  • щелочная пропитка
  • кислотное травление
  • растворители трихлор

Механический

  • пескоструйная обработка (соблюдайте осторожность, чтобы не повредить металлическую поверхность)
  • механическая обработка
  • шлифовка
  • щетка (проволочная щетка)

3: Установка соединений для пайки

Используйте минимально необходимые тиски или зажимы, необходимые для того, чтобы соединение было самонесущим (если возможно). Избегайте или, по крайней мере, помните о деформациях, вызванных теплопоглощающими материалами, такими как зажимы.

4: Флюс не устраняет необходимость очистки

Flux помогает при проблемах с окислением, вызванных кислородом в воздухе и газе. Слишком сильное окисление будет препятствовать капиллярному эффекту припоя. Некоторые присадочные металлы уже содержат агенты, которые действуют как флюс.

5: Пайка

Выбранный метод пайки зависит от типа и размера выполняемой работы.Для небольших работ обычно используется пайка кислородно-ацетиленовой горелкой. В других видах работ процессы пайки, такие как резистивная, индукционная, вакуумная и атмосферная пайка, могут быть более эффективными. Одним из советов при пайке является понимание того, что присадочные металлы притягиваются к поверхности с самой высокой температурой. Поэтому, если вы нагреваете непосредственно на поверхности соединения, припой может не заполнить соединение. Вместо этого цель состоит в том, чтобы нагреть внутренние облицовочные поверхности до нужной температуры и расположить припой близко к месту пайки.

6: Очистка после пайки

Остатки часто можно удалить с помощью горячей водяной бани после затвердевания наполнителя. Если это не удалит остатки, попробуйте струю воды и проволочную щетку. В крайнем случае — слабая кислотная ванна. Следуйте инструкциям производителя, чтобы избежать кислотного травления паяемого металла.

7: рассмотрите возможность использования многоцелевого паяльного стержня

Упростите выбор типов прутков для пайки с помощью универсального продукта, такого как HTS-2000.Он работает со всеми цветными сплавами, включая «все» алюминиевые сплавы (даже те, которые нельзя сваривать), магниево-алюминиевые смеси, цинк, литье под давлением, чугун, медь, бронзу, никель, титан и оцинкованные детали.

Пример паяного соединения алюминия

Видеодемонстрация

Процессы

Как правило, процессы пайки определяются в соответствии с методами нагрева (источниками), имеющими промышленное значение. Какой бы процесс ни использовался, присадочный металл имеет температуру плавления выше 840ºF (450ºC), но ниже основного металла и распределяется в соединении за счет капиллярного притяжения.

Процессы пайки:

  • Пайка горелкой
  • Пайка в печи
  • Индукционная пайка
  • Пайка сопротивлением
  • Пайка погружением
  • Инфракрасная пайка
  • Одеяло
  • Экзотермический

Пайка горелкой

Пайка

горелкой обычно используется для небольших производственных циклов или одной сборки. Этот тип пайки выполняется путем нагрева газовой горелкой, настроенной на необходимый состав и соответствующий флюс.Это зависит от требуемой температуры и количества тепла. Топливный газ (ацетилен, пропан, городской газ и т. д.) можно сжигать с воздухом, сжатым воздухом или кислородом.

Присадочный металл для пайки может быть предварительно помещен в соединение в виде колец, шайб, полос, заготовок или порошка, или он может подаваться из ручного присадочного металла в виде проволоки или стержня. В любом случае правильная очистка и флюсование необходимы.

Для ручной пайки горелка может быть оснащена одним наконечником, однопламенным или многопламенным.Ручная пайка горелкой особенно удобна для сборок, состоящих из секций неравной массы. Работа сварочного аппарата может быть организована там, где позволяет производительность, с использованием одной или нескольких горелок, оснащенных одним или несколькими пламенными наконечниками. Машина может быть предназначена для перемещения либо заготовки, либо факелов, либо того и другого. Для предварительного смешивания городского газовоздушного пламени используется горелка огнеупорного типа.

Пайка в печи

Пайка в печи широко используется, когда детали, подлежащие пайке, могут быть собраны с припоем припоя в виде проволоки, фольги, опилок, заготовок, порошка, пасты или ленты, предварительно размещенных вблизи или в месте соединения.Этот процесс особенно применим для высокопроизводительной пайки. Флюс используется, за исключением случаев, когда в печь специально вводится атмосфера для выполнения той же функции. Большая часть высокопроизводительной пайки выполняется в атмосфере восстановительного газа, такого как водород и газы сгорания, которые являются экзотермическими (образуются с выделением тепла) или эндотермическими (образуются с поглощением тепла). Чистые инертные газы, такие как аргон или гелий, используются для получения особых свойств атмосферы.

Большой объем пайки в печи выполняется в вакууме, что предотвращает окисление и часто устраняет необходимость в флюсе.Вакуумная пайка широко используется в аэрокосмической и ядерной областях, где соединяются химически активные металлы или где захваченные флюсы недопустимы. Если вакуум поддерживать непрерывной откачкой, он удалит летучие компоненты, выделяющиеся во время пайки. Есть несколько основных металлов и присадочных металлов, которые не следует паять в вакууме, потому что могут быть потеряны компоненты с низкой температурой кипения или высоким давлением паров. Обычно используемые типы печей бывают периодическими или непрерывными. Эти печи обычно нагреваются элементами электрического сопротивления, газом или маслом и должны иметь автоматический контроль времени и температуры.Охлаждение иногда осуществляется с помощью охлаждающих камер, которые либо размещаются над горячей ретортой, либо являются неотъемлемой частью конструкции печи. Инжекция принудительной атмосферы – еще один метод охлаждения. Детали могут помещаться в печь по отдельности, партиями или на непрерывном конвейере.

Вакуум является относительно экономичным методом создания точно контролируемой атмосферы пайки. Вакуум обеспечивает чистоту поверхности, необходимую для хорошего смачивания и текучести присадочного металла без использования флюсов.Неблагородные металлы, содержащие хром и кремний, можно легко спаять в вакууме, если в противном случае потребовался бы очень чистый атмосферный газ с низкой точкой росы.

Индукционная пайка

В этом процессе тепло, необходимое для пайки металлов, получают из высокочастотного электрического тока, состоящего из двигателя-генератора, резонансного разрядника и лампового генератора. Он индуцируется или производится без магнитного или электрического контакта в деталях (металлах). Детали размещаются внутри или рядом с катушкой с водяным охлаждением, по которой течет переменный ток.Они не являются частью электрической цепи. Припой обычно наносится заранее.

Тщательная конструкция соединения и установка катушки необходимы для того, чтобы поверхности всех элементов соединения одновременно достигли температуры пайки. Флюс используется, за исключением случаев, когда для выполнения той же функции специально вводится атмосфера.

Оборудование состоит из щипцов или зажимов с электродами, прикрепленными к концу каждого рычага. Щипцы желательно охлаждать водой, чтобы избежать перегрева.Плечи представляют собой проводники с током, присоединенные выводами к трансформатору. Можно использовать постоянный ток, но он сравнительно дорог. Также используются аппараты контактной сварки. Электроды могут быть из углерода, графита, тугоплавких металлов или медных сплавов в зависимости от требуемой проводимости.

Сопротивление

Теплота, необходимая для пайки сопротивлением, получается за счет сопротивления протеканию электрического тока через электроды и место пайки. Части, составляющие соединение, образуют часть электрической цепи.Твердый припой в какой-либо удобной форме предварительно размещается или подается с лицевой стороны. Флюсование производится с должным вниманием к электропроводности флюсов. (Большинство флюсов в сухом виде являются изоляторами.) Флюс используется, за исключением случаев, когда для выполнения той же функции специально вводится атмосфера. Детали, подлежащие пайке, удерживаются между двумя электродами, при этом применяется соответствующее давление и ток. Давление следует поддерживать до тех пор, пока соединение не затвердеет. В некоторых случаях оба электрода могут быть расположены на одной стороне сустава с подходящей подложкой для поддержания необходимого давления.

Пайка погружением

Существует два метода пайки погружением:

  • пайка погружением в химическую ванну
  • пайка погружением в ванну с расплавленным металлом.

Пайка погружением в химическую ванну

При пайке погружением в химическую ванну припой в подходящей форме предварительно размещается, а сборка погружается в ванну с расплавленной солью. Соляная ванна обеспечивает тепло, необходимое для пайки, и обычно обеспечивает необходимую защиту от окисления; в противном случае следует использовать подходящий флюс.Соляная ванна находится в металлическом или другом подходящем котле, также называемом печью, который нагревается снаружи через стенку котла с помощью размещенных в ванне единиц электрического сопротивления или за счет потерь I2R в ванне. сам.

Пайка погружением в ванну с расплавленным металлом

При пайке погружением в ванну с расплавленным металлом детали погружают в ванну с расплавленным присадочным металлом, находящуюся в подходящей емкости. Детали должны быть очищены и при необходимости профлюсованы. Над ванной расплава следует поддерживать покрытие из флюса, чтобы защитить его от окисления. Этот метод в основном ограничивается пайкой мелких деталей, таких как проволока или узкие полоски металла. Концы проводов или деталей должны быть прочно скреплены вместе при извлечении их из ванны до полного затвердевания припоя.

Инфракрасная пайка

Инфракрасное тепло – это лучистое тепло, полученное ниже красных лучей в спектре. В то время как при каждом «черном» источнике присутствует нормальный видимый свет, основной нагрев осуществляется невидимым излучением. В продаже имеются источники тепла (лампы), способные излучать до 5000 Вт лучистой энергии.Лампы не обязательно должны следовать контуру нагреваемой детали, даже если тепловложение изменяется обратно пропорционально квадрату расстояния от источника. Отражатели используются для концентрации тепла.

Сборки, предназначенные для пайки, поддерживаются в положении, позволяющем энергии воздействовать на деталь. В некоторых приложениях прилагается только сама сборка. Однако существуют приложения, в которых сборка и лампы помещаются в колпак или реторту, которые можно откачивать или в которых можно поддерживать атмосферу инертного газа. Затем сборку нагревают до контролируемой температуры, на что указывают термопары. После пайки деталь перемещается на охлаждающие плиты.

Одеяло для пайки

Пайка сплошным припоем — еще один процесс, используемый для пайки. Одеяло нагревается сопротивлением, и большая часть тепла передается частям двумя способами: теплопроводностью и излучением, причем последний отвечает за большую часть теплопередачи.

Экзотермическая пайка

Экзотермическая пайка – это еще один специальный процесс, при котором тепло, необходимое для плавления и текучести коммерческого присадочного металла, вырабатывается экзотермической химической реакцией в твердом состоянии.Экзотермическая химическая реакция определяется как любая реакция между двумя или более реагентами, в которой тепло выделяется за счет свободной энергии системы. Природа предоставила нам бесчисленное множество таких реакций; однако только реакции оксидов металлов в твердом состоянии или почти в твердом состоянии подходят для использования в экзотермических установках для пайки. Для экзотермической пайки используются упрощенные инструменты и оборудование.

В этом процессе используется тепло реакции для доведения прилегающих или близлежащих металлических поверхностей до температуры, при которой предварительно нанесенный твердый припой плавится и смачивает металлические поверхности раздела.Твердый припой может быть имеющимся в продаже металлом, имеющим подходящие температуры плавления и текучести. Единственными ограничениями могут быть толщина металла, который должен быть прогрет, и влияние этого нагрева или любой предшествующей термической обработки на свойства металла.

Использование канала Flux для снижения производственных затрат и повышения производительности. Он доступен со сплавами на основе алюминия и цинка.

В дополнение к обычным механическим требованиям к основному металлу при пайке необходимо учитывать влияние цикла пайки на основной металл и конечную прочность соединения.Упрочненные в холодном состоянии основные металлы будут подвергаться отжигу, когда температура и время процесса пайки будут находиться в диапазоне отжига обрабатываемого основного металла. Жаростойкие основные металлы также могут быть подвергнуты пайке методом «горяче-холодной обработки»; однако в твердом припое будут доступны только физические свойства после отжига. В цикле пайки обычно происходит отжиг холоднодеформированного основного металла, за исключением случаев, когда температура пайки очень низкая, а время нагревания очень короткое. Холодная обработка основного металла после пайки нецелесообразна.

Если твердый припой должен иметь прочность выше отожженных свойств основного металла после операции пайки, следует выбирать основной металл, поддающийся термообработке. Основной металл может быть с закалкой в ​​масле, с закалкой на воздухе, который может быть подвергнут пайке и закалке в ходе одной и той же или отдельной операции, или с дисперсионным твердением, при котором цикл пайки и цикл обработки на твердый раствор могут быть объединены. Закаленные детали можно припаивать низкотемпературным присадочным металлом с кратковременной температурной выдержкой для сохранения механических свойств.

Простота пайки

Прочность основного металла влияет на прочность паяного соединения. Некоторые основные металлы легче поддаются пайке, чем другие, особенно с помощью специальных процессов пайки. Например, основной металл на основе никеля с высоким содержанием титана или алюминия будет создавать особые проблемы при пайке в печи. Никелирование иногда используется в качестве барьерного покрытия для предотвращения окисления титана или алюминия, и оно представляет собой легко смачиваемую поверхность для припоя.

Пример паяного соединения, в котором медь была соединена с алюминием

Пайка присадочных металлов

Для удовлетворительного использования при пайке припои должны обладать следующими свойствами:

  1. Способность образовывать паяные соединения, обладающие механическими и физическими свойствами, подходящими для предполагаемого применения.
  2. Точка плавления или диапазон плавления, совместимые с соединяемыми основными металлами, и достаточная текучесть при температуре пайки для растекания и распределения в правильно подготовленных соединениях за счет капиллярного действия.
  3. Композиция достаточно однородна и стабильна, чтобы свести к минимуму разделение компонентов (ликвация) в условиях пайки.
  4. Способность смачивать соединяемые поверхности основных металлов и образовывать прочное прочное соединение.
  5. В зависимости от требований способность создавать или избегать взаимодействия основного металла с присадочным металлом.

Пайка серого чугуна

Серый чугун можно паять с очень небольшим предварительным нагревом или без него.

По этой причине сломанные отливки, которые в противном случае пришлось бы демонтировать и предварительно нагреть, можно припаивать на месте.

Цветной присадочный металл, такой как военно-морская латунь (60 процентов меди, 39,25 процента цинка, 0,75 процента олова), подходит для этой цели. Эта температура плавления цветного присадочного металла на несколько сотен градусов ниже, чем у чугуна; следовательно, работа может быть выполнена с меньшим подводом тепла, наплавка металла больше и пайка может быть выполнена быстрее.Из-за меньшего количества тепла, необходимого для пайки, возникающие термические напряжения менее серьезны, и термическая обработка для снятия напряжения обычно не требуется.

Подготовка крупных отливок к пайке во многом аналогична подготовке к сварке чугунными стержнями.

Соединение, подлежащее пайке, должно быть чистым, а деталь должна быть достаточно теплой, чтобы предотвратить охлаждение присадочного металла до того, как будет достигнуто достаточное проникновение и соединение.

По возможности стык следует пропаивать с обеих сторон, чтобы обеспечить равномерную прочность по всему шву.В тяжелых сечениях края должны быть скошены, чтобы образовать угол от 60 до 90 градусов по вертикали.

Ковкий чугун для пайки

Отливки из ковкого чугуна обычно ремонтируют пайкой, поскольку тепло, необходимое для сварки плавлением, разрушает свойства ковкого чугуна. Из-за специальной термической обработки, необходимой для придания ковкости, полностью восстановить эти свойства простым отжигом невозможно. Там, где возможна специальная термическая обработка, возможны сварка чугунным присадочным стержнем и повторная ковкость.

Для дополнительной информации о пайке различных типов металлов:

Пайка алюминия

Припой Чугун

Медная пайка

Магниевый припой

Серебряная пайка

Влияние климата на содержание и химический состав дубильных веществ листьев в зеленых и стареющих тканях Quercus rubra

Abstract

Экологические стрессы не только влияют на продукцию растительных метаболитов, но также могут изменять их резорбцию во время старения листьев.Динамика образования-рассасывания полифенольных танинов, класса защитных соединений, экологическая роль которых выходит за рамки старения тканей, может усилить влияние климата на экосистемные процессы. Мы изучили количество, химический состав и тканевую ассоциацию дубильных веществ в зеленых и свежесозревших листьях Quercus rubra , подвергнутых воздействию различных температур ( Прогревание и Без прогревания ) и обработок осаждением ( Сухой, Окружающий, Влажный). ) в Бостонском климатическом эксперименте (BACE) в Массачусетсе, США.Климат влиял не только на количество дубильных веществ, но и на их молекулярный состав и ассоциации с клеточными стенками. Независимо от климатических условий в таннинном составе Q. rubra преобладали конденсированные танины (ЦТ, проантоцианидины). При воздействии Dry и Ambient * Warm условий Q. rubra производил большее количество танинов, которые были менее полимеризованы. Напротив, в благоприятных условиях ( Влажный ) танины вырабатывались в меньших количествах, но СТ были более полимеризованы.Кроме того, даже когда общее содержание танинов в тканях снижалось, содержание гидролизуемых танинов (ГТ) увеличивалось при обработке Wet . Молекулярный состав дубильных веществ влиял на их содержание в стареющем помете. По сравнению с зелеными листьями содержание HTs уменьшилось в стареющих листьях при разных обработках, в то время как содержание CT было одинаковым между зелеными и стареющими листьями в обработках Wet , которые продуцировали больше полимеризованных танинов. Содержание общих танинов в стареющих листьях было выше при обработке нагреванием как при обработке сухим , так и при обработке окружающей средой осаждением.Наши результаты показывают, что, хотя климат непосредственно влиял на выработку танинов в зеленых тканях (и аналогичные закономерности наблюдались в стареющих тканях), влияние климата на содержание танинов в стареющих тканях было частично опосредовано влиянием на химический состав танинов. . Эти различные климатические воздействия на листья в течение вегетационного периода могут изменить динамику леса не только в динамике разложения и круговорота питательных веществ, но и в динамике травоядных.

Ключевые слова: гидролизуемые дубильные вещества, конденсированные дубильные вещества, засуха, потепление, проантоцианидины, Quercus rubra

Введение

Глобальные изменения, оказывая широкое влияние на все биологические процессы, могут существенно влиять на жизненные циклы и функции растений (Norby и Луо, 2004). Повышенные уровни CO 2 и озона, повышенные температуры, а также более частые засухи изменяют содержание и состав растительных метаболитов, нарушая физиологическую стехиометрию растений (Kuokkanen et al., 2001; Xu and Zhou, 2006; Prior et al., 2011; Xu et al., 2014, 2015), что влияет на выживаемость и распространение растений. Кроме того, влияя на химический состав стареющей подстилки, которая подпитывает метаболизм почвенных гетеротрофов, физиологические изменения растений, вызванные климатом, также могут влиять на круговорот питательных веществ в почве и продуктивность экосистемы.Например, вызванные климатом изменения в составе стареющих листьев (Top and Filley, 2014; Suseela et al., 2015) могут повлиять на последующую детритофагию (Currano et al., 2008; Couture et al., 2012), которая регулирует круговорот почвенного углерода и минеральных питательных веществ (Aerts, 1997; Liu et al., 2009; Suseela et al., 2013), что, в свою очередь, может повлиять на продуктивность экосистемы. Эти продолжительные воздействия экологического стресса на работу экосистемы могут быть частично опосредованы климатической регуляцией защитных соединений, которые сохраняют свои биологически-ингибирующие свойства даже после старения тканей.

Полифенолы, особенно дубильные вещества, представляют собой экологически значимые многогранные вторичные метаболиты на основе углерода, которые распространены у большинства видов растений (Kraus et al., 2003a). Эти соединения выполняют многочисленные защитные функции и облегчают взаимодействие растений с биотической и абиотической средой в период активного роста тканей и после старения тканей. В зеленых тканях в качестве защитных соединений таннины играют решающую роль во взаимодействиях между растениями и травоядными и между растениями (Salminen and Lempa, 2002; Kraus et al., 2003а; Barbehenn, Constabel, 2011), а также служат фотозащитными средствами (Close, McArthur, 2002). Дубильные вещества в стареющих листьях могут составлять до 25% сухой массы листа (Kraus et al. , 2003b) и, таким образом, могут быть основной формой углерода, достигающего подземных экосистем. Дубильные вещества в стареющих тканях также сохраняют свою способность образовывать комплексы с белками (Hagerman et al., 1998) и инактивировать ферменты почвы (Triebwasser et al., 2012), что может препятствовать минерализации азота в почве (Hättenschwiler and Vitousek, 2000; Kraus et al., 2003а; Адамчик и др., 2013; Tharayil и др., 2013). Таким образом, условия окружающей среды, существующие во время роста растений, регулируя образование дубильных веществ в зеленых тканях, могут влиять на круговорот углерода и азота в почвах.

Дубильные вещества можно в целом разделить на конденсированные таннины (КТ) и гидролизуемые таннины (ГТ; Kraus et al., 2003a), при этом голосеменные и однодольные продуцируют преимущественно СТ, а двудольные способны продуцировать ГТ или СТ по отдельности или в виде смесей (Bate -Smith, 1977; Haslam, 1988; Kraus et al., 2003а; Трибвассер и др., 2012). Конденсированные танины, также известные как проантоцианидины, представляют собой полимеры флаван-3-олов, таких как катехин и галлокатехин (Xie and Dixon, 2005). Гидролизуемые таннины состоят из звеньев галловой кислоты, связанных сложноэфирной связью с функциональной группой глюкозы, и могут быть дополнительно классифицированы как галлотаннины и эллагитанины по соответствующему наличию или отсутствию галлоильных групп, связанных С-С (Hartzfeld et al., 2002). . У растений производство танина обусловлено генетически (Scioneaux et al., 2011), а также экологически контролируемые (Tharayil et al., 2011). Условия окружающей среды, влияющие на выработку дубильных веществ, включают фотопериод, рН почвы, влажность и доступность питательных веществ, растительноядность и атмосферный CO 2 и O 3 (Herms and Mattson, 1992; Bussotti et al., 1998; Kraus et al. , 2003a; Коэн и Кеннеди, 2010; Яакола и Хохтола, 2010; Линдрот, 2010; Малиш и др., 2016). Наряду с их общим количеством биологическая реакционная способность дубильных веществ строго регулируется химическим составом полимера, , а именно .идентичность мономеров, характер замещения фенольного кольца и степень полимеризации (Kraus et al. , 2003b). Хотя было показано, что количества танинов реагируют на изменения окружающей среды, мало что известно о влиянии климата на химический состав танинов. Кроме того, меньше известно об изменениях в составе дубильных веществ между зелеными и стареющими тканями, на которые в первую очередь влияет общий резорбционный метаболизм во время старения тканей.

Мы исследовали влияние потепления и изменения осадков на выработку танина у Quercus rubra , важного вида во многих лесных экосистемах восточной части Северной Америки (Prasad et al., 2007-настоящее время). В частности, мы стремились определить интерактивные эффекты температуры и осаждения на (1) содержание и молекулярный состав танинов, (2) ассоциацию танинов в различных тканевых фракциях (оперативно определяемые как экстрагируемые и неэкстрагируемые танины) и (3). ) различаются ли климатические воздействия на содержание и химический состав дубильных веществ в зеленых и стареющих листьях. Мы предположили, что создаваемые нами климатические стрессы (засуха, повышение температуры) будут индуцировать образование танинов, различающихся по количеству и составу, и что климатические изменения состава танинов в зеленых листьях также будут влиять на содержание танинов, сохраняется в стареющих листьях.

Методы и материалы

Описание объекта

Образцы были отобраны в ходе Бостонского климатического эксперимента (BACE), расположенного в Уолтеме, штат Массачусетс, США. Эксперимент проводится в экосистеме старого поля, а почва представляет собой Mesic Typic Dystrudept (серия Haven) с суглинистым верхним слоем (0–30 см; соотношение песок:ил:глина 45:46:9) на гравийной супеси. недра. BACE включает четыре обработки температурой и три обработки осаждением и разделен на три повторяющихся блока с 12 участками (2 × 2 м, с расстоянием между участками 1 м) в каждом блоке.Для предотвращения бокового движения воды заделывают каждый участок полиэтиленовыми листами на глубину 0,6 м. Каждый блок имеет атмосферные (т.е. контрольные, неуправляемые), влажные (150 % атмосферных осадков в течение вегетационного периода) и сухие (50 % атмосферных осадков в течение всего года) зоны осадков, которые управляются посредством системы пассивного удаления и активного перераспределения. монтируются над участками на открытых каркасах теплиц. Сухие участки расположены под частями каркаса теплицы, покрытыми равномерно расположенными прозрачными шестидюймовыми планками из поликарбоната (15-сантиметровые планки, расположенные на расстоянии 15 см друг от друга), которые исключают 50% поступающих осадков.Рамы над обработкой Ambient и Wet покрыты сеткой для оленей, которая обеспечивает аналогичное затенение, уменьшая фотосинтетически активное излучение примерно на 6%, но пропуская все осадки. Осадки, собранные с сухих участков, немедленно повторно наносили на Wet . участки с помощью электрических насосов и дождевальной системы (Hoeppner and Dukes, 2012). В пределах каждой зоны осадков есть участки, соответствующие одному из четырех уровней потепления: нет потепления, слабое (+c.1,0°C), средний (+ок. 2,7°C) и высокий (+ок. 4,0°C) (Tharayil et al., 2011; Hoeppner and Dukes, 2012; Suseela and Dukes, 2013). Начиная с 2008 г. применялись утепляющие процедуры с помощью инфракрасных обогревателей, установленных на высоте 1 м над каждым углом участка. Температуру в середине участков измеряли каждые 10 с. Разница в температуре между растительным покровом самого теплого и окружающего участков в каждой группе из четырех участков использовалась для достижения контроля с обратной связью (Hoeppner and Dukes, 2012).По краям каждого участка в апреле 2012 г. были посажены три растения с открытыми корнями (30–45 см) различных видов деревьев, таких как Q. rubra, Betula lenta, Ulmus americanus и Betula populifolia . зрелые, не затененные листья были собраны с трех деревьев Q. rubra на участок в 2013 г. в течение первой недели сентября (зеленые листья) и во вторую неделю октября (свежесозревшие листья). Листья одинакового размера собирали от 2 до 3 верхушечных мутовок с дерева во время каждого сбора урожая, в результате чего на участке за один сбор урожая было не менее 12 листьев.Листья с деревьев на участке объединяли для получения составного образца. Листья были подвергнуты мгновенной заморозке между пластинами сухого льда сразу после сбора урожая, а образцы хранились при температуре ниже -20°C во время всех анализов. Листья Q. rubra , использованные для этого исследования, были собраны в результате обработки в ненагретом ( No Warm ) и высокотемпературном ( Warm ) вариантах Dry, Ambient и Wet осаждения. Во всех анализах для каждой обработки сохраняли три повторения лечения.

Экстракция тканей

Черешки листьев удаляли и образцы замороженных листьев тонко измельчали ​​в сухом льду с помощью ступки и пестика. Приблизительно 100 мг измельченной ткани дважды экстрагировали 10 мл 100% МеОН. Ткани, экстрагированные метанолом, дополнительно трижды экстрагировали 10 мл 75% ацетона. На каждом этапе экстракции ткани обрабатывали ультразвуком в течение 2 минут, а затем встряхивали в течение 2 часов. Супернатант из пяти экстракций объединяли для получения составной экстрагируемой фракции.Экстракты хранили при -20°С, а оставшийся опад (неэкстрагируемый) промывали 2 мл 80%-ного метанола и сушили в течение ночи при 40°С.

Количество конденсированных танинов

Общее содержание конденсированных танинов (CTs) в объединенных экстрактах и ​​в остатках подстилки было количественно определено с использованием кислотно-бутанольного анализа, модифицированного Porter et al. (1986). Что касается экстрагируемых танинов, пробы (2 мл) объединенного экстракта сушили в атмосфере газа N 2 при 40°C перед добавлением 6 мл реагента бутанол:HCl (95:5).Для анализа неэкстрагируемых дубильных веществ примерно 20 мг остаточного мусора помещали в стеклянные пробирки и смешивали с 6 мл реагента бутанол:HCl. Затем образцы помещали на водяную баню при температуре 90–95°С на час, а затем охлаждали на льду. Количество деполимеризованного антоцианидина в образцах определяли спектрофотометрически путем измерения оптической плотности при 550 нм (спектрофотометр Jasco V-550 UV/VIS, Jasco, Analytical Instruments, Easton, MD, USA) с количеством танинов, определяемым количественно по стандартной кривой, полученной из очищенных дубильных веществ Q.rubra , собранный с того же экспериментального участка, что и описанный Tharayil et al. (2011). Поскольку танины Quercus представляют собой смесь CT и HT, массовый процент CT в очищенных танинах определяли во время деполимеризации очищенных танинов в присутствии избытка флороглюцина, как описано ниже. Концентрация CT на стандартной кривой была скорректирована соответствующим образом, чтобы избежать возможного переоценивания танинов.

Средняя степень полимеризации и мономерная идентичность конденсированного танина

Масс-спектрометрический анализ неповрежденных полимерных танинов является сложной задачей, особенно при использовании электрораспыления в качестве интерфейса ионизации.Это связано с тем, что по мере увеличения степени полимеризации снижается эффективность ионизации проантоцианидинов (Karonen et al., 2006; Mouls et al., 2011). Также стабильность депротонированных проантоцианидинов и их фрагментов снижается с увеличением степени полимеризации молекулы (Gu et al., 2003). В совокупности это привело бы к недостаточной выборке полимеров с более высокой длиной цепи, таким образом недооценивая степень полимеризации проантоцианидинов в образце. Чтобы дополнительно прояснить химию CT, состав субъединиц и среднюю степень полимеризации определяли путем деполимеризации CT в присутствии избытка флороглюцина (Kennedy and Jones, 2001; Karonen et al. , 2006). Реагент флороглюцина готовили путем растворения 2,5 г флороглюцина в 55 мл метанола, содержащего 400 мкл концентрированной HCl. Реагент барботировали аргоном в течение ~30 мин, пока объем метанола не уменьшился до 50 мл. В стеклянные пробирки, содержащие ~150 мг тонкоизмельченных тканей листьев, не подвергавшихся предварительной экстракции растворителем, добавляли по 2 мл реагента. Затем образцы в пробирках барботировали аргоном в течение еще 2 мин, немедленно закрывали крышками с тефлоновым покрытием и инкубировали на нагревательном блоке при 50°С в течение 130 мин.Затем пробирки охлаждали на льду, центрифугировали (1000 g , 5 мин) и 1,5 мл супернатанта переносили в центрифужные пробирки. К супернатанту добавляли насыщенный раствор MgSO 4 (~45 г в 100 мл воды) и образцы снова охлаждали на льду для облегчения последующего разделения фаз. Для жидкостно-жидкостной экстракции добавляли 1,5 мл этилового эфира и встряхивали пробирки встык на ротационном шейкере в течение 5 мин. Пробирки центрифугировали (1000 g , 5 мин) и 40 мкл верхней фракции этилового эфира переносили в 100 мкл стеклянные вставки и полностью сушили в атмосфере газа N 2 .Образцы восстанавливали в 50% метаноле и анализировали с использованием жидкостного хроматографа, соединенного с масс-спектрометром с тройным квадруполем. Подробные параметры хроматографии и масс-спектрометрии приведены во вспомогательной информации.

Идентичность пиков была определена на основе аутентичных стандартов катехина и галлокатехина, а также значений, приведенных в литературе для аддуктов флороглюцина и фрагментов процианидина (таблица). Также сравнивали картины масс-спектров относительно неаддуктированных исходных мономеров.Концентрации экстрагируемых мономеров катехина вычитали из результата анализа деполимеризации флороглюцина. Относительные массовые ответы (Kennedy and Jones, 2001) использовали для нормализации различий в ответах ESI между концевыми единицами и аддуктами флороглюцина. Содержание процианидина определяли с использованием катехиновых и эпикатехиновых мономеров, а также их фрагментов. Содержание продельфинидина определяли как пару галлокатехин/эпигаллокатехин (таблица). Среднюю степень полимеризации проантоцианидинов определяли путем деления суммы нормированных площадей пиков звеньев-удлинителей (аддуктов флороглюцина катехина, галлокатехина) на сумму площадей пиков концевых звеньев (катехина и галлокатехина).

Таблица 1

Идентификация и классификация конденсированных мономеров танина .

Конденсированные мономеры Tannin

5

5

[M-H]
(+) – Catechin Procyanidin 289
(-) – эпикатехин Procyanidin 289
(-) – эпигаллокатехин Procyanidin 305
(+) – катехин с флороглюцин аддукта Procyanidin 413
(-) – эпи-катехин с флороглюцин аддукта Procyanidin 413
Эпи-галлокатехин с флороглюцин аддукта Prodelphinidin 429

гидролизуемых анализ танина

Для количественного определения гидролизуемых дубильных веществ (ГТ) метанолиз проводили с пробой метанольного экстракта или 40 мг экстрагированного метанолом остаточного помета в метанольном растворе H 2 SO 4 при 85°C, как описано Hartzfeld et al. (2002). Затем концентрации метилгаллата определяли количественно с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (ВЭЖХ; см. вспомогательную информацию). Эллаговая кислота (эллагитаннины) и метилгаллат (галлотаннины) были идентифицированы и количественно определены в образцах с использованием аутентичных стандартов. Эффективность метилирования контролировали путем измерения процента метилирования стандарта галловой кислоты в условиях, аналогичных описанным выше.

Расчеты и статистический анализ

Общую концентрацию дубильных веществ в ткани листа рассчитывали путем суммирования концентраций ХТ и ГТ.Подвыборка листьев, собранных в одно и то же время, использовалась для определения удельной площади листьев, которая была одинаковой между зелеными и свежесобранными листьями для всех вариантов обработки, что означает, что тенденции, наблюдаемые на основе массы, будут аналогичными, если основываться на площади (см. рис. S1 в Сусила и др., 2015).

Чтобы проверить основные и интерактивные эффекты потепления и измененных осадков на CT и HT, в SAS 9 использовалась смешанная модель с ограниченной оценкой максимального правдоподобия (REML) со временем выборки (зеленый или стареющий) в качестве повторных измерений. 2 (SAS Institute, Inc., Кэри, Северная Каролина, США). Степени свободы рассчитывали по методу Кенворда-Роджерса. Потепление и осадки рассматривались как фиксированные эффекты, а блоки рассматривались как случайные эффекты. Тест множественного сравнения Тьюки HSD использовался для выявления различий между видами лечения. Значимость была установлена ​​на уровне α = 0,05.

Результаты

Тип танинов

Общая концентрация танинов в зеленых листьях менялась в зависимости от температуры и обработки осадками (рис. ; таблица S1).Зеленые листья, сформированные при обработке Dry * Warm и Ambient * Warm , имели самые высокие концентрации общих дубильных веществ (121,2 и 128,8 мг/г -1 , соответственно); в то время как обработка Ambient * No Warm имела самую низкую общую концентрацию танина (73,5 мг г -1 ткани; рис. ). Только обработка Ambient показала увеличение концентрации танина в зеленых листьях с повышением температуры ( P < 0. 001). Эта закономерность также наблюдалась в стареющих тканях, где концентрация танина в стареющих листьях также увеличивалась с повышением температуры как в Dry (увеличение на 34%; P <0,005), так и в Ambient (увеличение на 53%; P < 0,004) лечения (рис. , таблица S1). При обработке Warm стареющие листья при более сухих обработках содержали больше дубильных веществ ( P <0,05; рис. ). Сухой * Теплый имел самую высокую концентрацию (110.5 мг г -1 ткани) и Влажный * Теплый имел самую низкую концентрацию (62,1 мг г -1 ткани) общего количества танинов (рис. ). Та же тенденция была очевидна для стареющих листьев, подвергшихся воздействию Dry, Ambient и Wet при обработке NoWarm . Уменьшение общего содержания танинов между зеленой и стареющей тканью наблюдалось для обработки Wet ( P <0,05) и обработки Ambient * No Warm ( P <0. 05).

Общее среднее (±SE) содержание танинов в зеленой (A) и стареющей (B) ткани листа. Звездочки ( * ) над набором столбцов указывают на значительные ( P < 0,05) различия между обработками No Warm и Warm в рамках каждой обработки осаждением. Буквы верхнего регистра указывают на значительные различия ( P < 0,05) между обработкой осаждением в температурном режиме No Warm .Буквы нижнего регистра указывают на существенные различия ( P < 0,05) между обработкой осаждением в температурном режиме Warm .

При разделении общего количества танинов на CT и HT, CT составляют от 29 до 89% ткани зеленого листа и 53–88% ткани стареющего листа. В зеленой ткани после обработки Wet * No Warm ГТ составляли больший процент от общего количества танинов (~69%) (таблица). В тканях зеленых листьев нагревание не изменило концентрации HT в Dry, Ambient ( P = 0. 06), или обработки Wet ( P = 0,12) (таблица). Обработка преципитацией Wet показала самый высокий процент HT в ткани зеленых листьев как для No Warm (69,1%), так и для Warm (50,0%) (таблица). В стареющих тканях листьев нагревание увеличивало ( P < 0,001) процент HT при обработке Ambient , но уменьшало HT ( P < 0,001) при обработке Wet (таблица). На непрогретых участках листья, обработанные Ambient , имели самый низкий процент HT, а листья, обработанные Wet , имели самый высокий процент (таблица).Стареющая ткань листа имела более низкий ( P <0,05) процент HT, чем зеленая ткань при всех обработках Wet и Ambient * Warm .

Таблица 2

Процентное содержание гидролизуемых танинов, рассчитанное по общему содержанию танинов (±SE) как для зеленых, так и для стареющих тканей листьев .

9016 A 9016 A
Лечение Зеленый Senesced
Осадки Температура % HT % HT
Сухая Без подогрева 30. 7 ± 4.0 A 21.2 ± 0,4 A
Сухой Теплая Теплый Теплый 24,4 ± 1,3 A 20,6 ± 0,9 A
Ambient Нет теплых 13,5 ± 1.4 A 12.7 ± 0,6 * B
Ambient Toper 36,1 ± 0,9 AB 26. 0 ± 1,2 A
WUT No Toper 69 .1 ± 0,9 B 9 42,2 ± 2.2 * C
Toper Теплый 6 50,0 ± 2.0 B 26.3 ± 1,2 A

Ответы КТ на климат обработка была аналогична обработке общих танинов (рис. ). Теплая обработка не увеличивала общее количество CT в зеленых листьях ни при одной из обработок осаждением Сухая ( P = 0,41), Окружающая среда ( P = 0. 14), или Влажный ( P = 0,42; рис. ). Теплая обработка увеличивала общее количество CT в стареющих листьях для Dry ( P < 0,02), но не для Ambient ( P = 0,15) или Wet ( P = 0,02). ; Фигура ). В то время как общее содержание CTs не изменилось между зеленой и стареющей тканью листа, содержание CTs в общей доле танинов значительно ( P < 0.05) увеличен для моделей Wet * No Warm и Ambient * Warm и Wet * Warm .

Суммарное среднее (±SE) содержание танинов в конденсированных (A,B) и гидролизуемых (C,D) для экстрагируемых и неэкстрагируемых частей зеленого (A,C) и стареющего (B) ,D) ткань листа. Верхние звездочки ( * ) указывают на существенные различия ( P < 0.05) между обработками No Warm и Warm в рамках каждой обработки осаждением экстрагируемых конденсированных танинов, а нижние звездочки указывают на значительный эффект нагревания при каждой обработке осаждением неэкстрагируемых конденсированных танинов. Различные прописные буквы указывают на значительные различия ( P < 0,05) между обработкой осаждением в температурном режиме No Warm . Различные строчные буквы указывают на существенные различия между обработками осаждения в рамках обработки Warm .

Климатические воздействия повлияли на химический состав ЦТ в тканях листа (табл. ). Лечение Wet имело CT с более длинными цепями субъединиц, чем при лечении Dry и Ambient (таблица). Соотношение эпи/катехина к эпи/галлокатехину или процианидина (PC) к продельфинидину (PD) отличалось только обработкой преципитацией; нагревание не изменило процент мономеров CT, которые были PD или PC. Обработка Ambient имела самый высокий процент PD (~ 27%), а Wet — самый низкий, <6.8%, с промежуточным продуктом обработки Dry (~10–14%; таблица).

Таблица 3

Процент (±SE) типа конденсированных танинов и средняя (±SE) длина цепи полимеров конденсированных танинов .

Процедура

5 PD%

5

0 Длина цепи (средняя степень полимеризации)

Осаждение температура 9016 B
Сухой теплый 13.8 ± 1,5 A 6.2 ± 0,5 B
Сухой Теплый Теплый 10,2 ± 1,7 A 70417 7. 4 ± 0,6 B
Ambient No Toper 27.7 ± 1.9 B B 9 6.1 ± 1,5 B
Ambient Теплый Теплый 27,7 ± 1,3 B 6,9 ± 0,5 B
Wet Нет теплых 5. 2 ± 0.3 C C 8,9 ± 0,8 A
Toper Теплый Теплый 60131 60131 6.8 ± 0,5 C 9,6 ± 1,4 A

Общее содержание HTS в зеленом ткани увеличивались при нагревании под воздействием осадков Ambient ( P < 0,01), но уменьшались при нагревании при обработке Wet ( P < 0,02; рисунок). В стареющих тканях HT обычно составляли меньший процент от общей концентрации танинов, чем в зеленых тканях (рис. 1).Аналогичные тенденции между обработками Warm и No Warm также проявлялись в стареющей ткани, за исключением стареющей ткани листьев, различия между Warm и No Warm были значительными для всех обработок преципитацией. Нагревание увеличивало HT при обработке Dry ( P < 0,01) и Ambient ( P < 0,001), но снижало их при обработке Wet ( P < 0.005; Фигура ). Общее содержание HT значительно уменьшилось от зеленой до стареющей ткани листа при обработке Wet * No Warm и во всех обработках Warm .

В листьях Q. rubra ГТ можно далее дифференцировать на два структурных соединения ГТ: эллагитаннины и галлотаннины (таблицы , ). Как в зеленых, так и в стареющих тканях обычно было более высокое содержание эллагитаннинов, хотя общее содержание было выше в зеленых тканях по сравнению со стареющими тканями (таблица).В зеленой ткани как галлотаннины, так и эллагитаннины показали одинаковую взаимосвязь, где Ambient * No Warm обработка имела наименьшее значение ( P <0,05; таблица). Аналогичная взаимосвязь существовала и в ткани стареющего листа (таблица). В течение вегетационного периода содержание эллагитаннина уменьшалось в зеленых и стареющих тканях листьев, но только при обработке влажными ( без теплого, P <0,05; теплое, P <0.001). Общее содержание галлотанина также уменьшилось ( P <0,05) между зеленой и стареющей тканью листа во всех обработках, кроме контроля Ambient * No Warm .

Таблица 4

Средние концентрации, мг г −1 ткани, (±SE) структурных типов гидролизуемых таннинов как для зеленых, так и для стареющих тканей листьев .

* A 9016 A A
Обработки Зеленый Senesced
Осадки Температура Gallotannins эллаготанины Gallotannins эллаготанины
Сухой Без подогрева 15. 4 ± 2.0 20.4 ± 4.8 A 80417 80417 8.7 ± 0.1 * A
Сухой Теплый Теплый 12,6 ± 0,6 A 18.8 ± 1.3 A 10.0 ± 0,7 A 12,6 ± 0,04 12,6 ± 0,04
Ambient Нет теплого No Toper 2,3 ± 0,2 * B 7,8 ± 1,8 * B 1,6 ± 0,2 5. 3 ± 0,6 * B * B
Ambient Теплый Теплый 20,3 ± 1,4 A 26.2 ± 4.1 A 9,9 ± 0,4 A 11,8 ± 0,9 ab
WUT No Toper 24,8 ± 2.2 * A 37,9 ± 3.6 10417 10. 9 ± 0.1 A 10,3 ± 0,2 A
Wet .2 ± 0,5 A 25,4 ± 0,3 A 7,3 ± 0,2 A 9,0 ± 0,2 B

Фракции Tannin

Total Tannins, разделенные при отделении в экстрагируемый и неакспедированный фракции, показали сходные закономерности как в зеленой, так и в стареющей ткани листа (таблица). Для экстрагируемых фракций самая низкая концентрация дубильных веществ была при обработке осаждением Wet без согревающего эффекта (таблица).Нагревание увеличивало неэкстрагируемую фракцию в ткани зеленых листьев ( P <0,05) при обработке Ambient (таблица) и не влияло на неэкстрагируемую фракцию в стареющих тканях. Как в зеленых, так и в стареющих тканях листьев самая низкая концентрация неэкстрагируемых танинов наблюдалась при обработке Ambient * No Warm (таблица). Между сезонами (зеленый и стареющий) наблюдалось снижение (5,2%) в контроле Ambient * No Warm и увеличение (13.2%) в обработке Wet * Warm в процентах экстрагируемых танинов.

Таблица 5

Средние концентрации, мг г −1 ткани, (±SE) общего количества экстрагируемых и неэкстрагируемых танинов в зеленой и стареющей ткани листьев .

A A 9
Обработки Зеленый Senesced
Осадки Температура Extractable Non-извлекаемые Extractable Неэкстрагируемый
Сухой Без подогрева 71. 6 ± 2.1 43,3 ± 7.6 A 57,8 ± 4.7 57,8 ± 1,0 A 24,4 ± 1,0 A
Сухой Теплый 81,2 ± 5,1 A 40,0 ± 3.6 A 68.9 ± 5.8 A 41,5 ± 1,6 A
Ambient No Top No Toper 57,2 ± 4,5 A 16,4 ± 1,6 * B 39,5 ± 3. 2 AB AB 15.0 ± 1,5 B
Ambient Теплый Теплый 78,1 ± 4,0 78,1 ± 4,0 50,6-30131 50,6 ± 3,0 A 51,8 ± 3,2 ab 31.9 ± 1,1
No Top No Top No Top 29. 2 ± 3.3 A 61,8 ± 6.6 A 23.0 ± 2.4 B 27,7 ± 0,4 AB WET Теплый 37.8 ± 1,6 A 43,6 ± 1,4 A 3717 37,1 ± 3.0 B 25,0 ± 0,1 A

Большинство CTS расположены в добываемой доле (фигуры). Прогревание не повлияло на общее содержание ЦТ каждой фракции в ткани зеленого листа (рис. ). Процент неизвлекаемых CT в зеленой ткани был выше в Wet * No Warm ( P < 0.005), но не Влажный * Теплый ( P = 0,09; Рисунок 4A ). Обработка Ambient имела самый низкий процент неизвлекаемых ТТ ( No Warm = 12,2%, Warm = 11,7%; Рисунок 4A ). В стареющих тканях согревание оказывало влияние только при обработке Dry , где повышало ( P < 0,001) содержание ТТ в неэкстрагируемой фракции (рис. ). Процент неэкстрагируемых ТТ имел тенденцию к увеличению с нагреванием только при обработке Dry , и то незначительно ( P < 0.1; Фигура ). В температурной обработке No Warm , Wet имел самый высокий процент (28,4%) неизвлекаемых ТТ (рис. ). Процент неэкстрагируемых CT значительно увеличился (на 8,5, 11,4 и 9,3%) от зеленых листьев до стареющих листьев для Wet * No Warm, Dry * Warm и Ambient3 * Теплый соответственно.

Средний (±SE) процент неэкстрагируемых конденсированных танинов для зеленой (A) и стареющей (B) ткани листа.Звездочки ( * ) над набором столбцов указывают на значительные ( P <0,05) различия между обработками No Warm и Warm в рамках каждой обработки осаждением. Различные прописные буквы указывают на существенные различия между обработками осаждения в температурном режиме No Warm . Различные строчные буквы указывают на существенные различия между обработками осаждения в температурном режиме Warm .

Относительное большинство HT было расположено в неэкстрагируемой фракции (рисунки ) как для зеленой, так и для стареющей ткани. В тканях зеленых листьев нагревание увеличивало доли HT как в экстрагируемых ( P <0,03), так и в неэкстрагируемых ( P <0,005) фракциях обработки Ambient (рис. ). Нагревание также уменьшило ( P < 0,03) HT в неэкстрагируемой фракции при обработке Wet (рис. ). Аналогичные закономерности наблюдались и в стареющих тканях (рис. 1), где HT также увеличивались с нагреванием при лечении Dry (рис. 1).

Для отдельных HT процент галлотаннинов увеличился больше всего при обработке Ambient , при этом Ambient * No Warm имел самый низкий процент галлотаннинов (рис. ). При обработке Ambient нагревание увеличивало содержание галлотанинов в экстрагируемой фракции как в зеленой, так и в стареющей ткани листа (рис. ). В стареющих тканях нагревание при обработке Ambient также увеличивало процентное содержание галлотанина в неэкстрагируемой фракции (этого паттерна не наблюдалось в ткани зеленого листа; P = 0.09, рисунки ). При обработке Wet стареющие листья содержали больше галлотанинов (11,8%, No Warm ; 7,7% Warm ) в неэкстрагируемой фракции, чем в ткани зеленого листа.

Среднее (±SE) процентное содержание галлотанинов в неэкстрагируемых и экстрагируемых гидролизуемых танинах как для зеленых (A,B) , так и для стареющих (C,D) тканей листьев. Звездочки ( * ) над набором столбцов указывают на значительные ( P < 0,05) различия между обработками No Warm и Warm в рамках каждой обработки осаждением.Буквы верхнего регистра указывают на существенные различия между обработкой осаждением в температурном режиме No Warm . Буквы нижнего регистра указывают на существенные различия между обработками осаждения в температурном режиме W arm .

Дискуссия

Климатические стрессы, нарушающие клеточное функционирование растений, инициируют перестройку метаболических путей, что, в свою очередь, способствует адаптации растений к новой среде. Результирующее перепрограммирование важных метаболических путей, включая фенилпропаноидный путь, цикл лимонной кислоты, гликолиз и цикл мочевины, приводит к усилению регуляции нескольких классов метаболитов, таких как аминокислоты, фенольные кислоты, сахара, органические кислоты, сахарные спирты, полиамины и полиолы (Bohnert et al. , 1995; Пенуэлас и др., 2013 г.; Сусила и др., 2015). Было показано, что засуха и более высокие температуры влияют на множество различных морфологических (урожайность, рост) и физиологических (скорость фотосинтеза, устьичная проводимость, пигментация листьев, водный потенциал, концентрация белка и т. д.) реакций растений (Benjamin and Nielsen, 2006; Rennenberg). и др., 2006; Праба и др., 2009; Анджум и др., 2011). Однако менее известно влияние стрессоров окружающей среды на содержание и состав полимерных защитных соединений в зеленых и стареющих тканях растений.

В этом исследовании вызванные климатом изменения в составе танинов в листьях повлияли не только на количество танинов, но и на соотношение HTs к CTs, мономерный состав и среднюю степень полимеризации CTs, состав HTs, ассоциацию танинов в пределах клетки (экстрагируемые и неэкстрагируемые) и состав дубильных веществ, оставшихся в стареющих листьях. В целом, растения, растущие в благоприятных условиях ( В условиях окружающей среды * Без тепла, Влажность ) производили меньше дубильных веществ на единицу массы листа, чем растения, растущие в более стрессовых условиях ( Сухие условия, В условиях окружающей среды * Теплые ). Часто сообщалось об увеличении содержания дубильных веществ в тканях при усилении экологического стресса (Bussotti et al., 1998; Cohen and Kennedy, 2010). Перераспределение питательных веществ в растениях на основе благоприятных условий роста и питательных веществ ожидается в соответствии с двумя основными гипотезами: баланс углерода/питательных веществ и баланс роста/дифференциации (Herms and Mattson, 1992). Увеличение производства танинов в условиях Сухих * Теплых условий может быть защитной стратегией растений для защиты уже приобретенных ими ресурсов (Herms and Mattson, 1992; Wright et al., 2010; Массад и др., 2014). В то же время при обработке Wet , поскольку условия роста были предположительно ближе к оптимальным, снижение продукции танина могло быть результатом того, что растение предпочитало выделять углерод для роста, а не для защиты (Bryant et al., 1983; Tuomi). , 1992). Кроме того, более высокая концентрация дубильных веществ, связывающихся с матрицей целлюлозы и лигнина (Zucker, 1983; Bussotti et al. , 1998), потенциально может создать физическое сопротивление расширению клеток. Аналогичная схема распределения фотосинтетических соединений для роста, а не для защитных соединений, ранее сообщалась у других видов деревьев (Donaldson et al., 2006), где рост растений отрицательно коррелировал с фенолами и ХТ. В предыдущем исследовании, проведенном в BACE, содержание танинов в состарившихся листьях Acer rubrum было выше при обработке Dry , чем при обработке Ambient , в то время как устаревшие листья Wet и Ambient имели одинаковое содержание танинов. (Тараил и др., 2011). Эту контрастирующую картину можно объяснить разницей в физиологических реакциях двух видов на стресс, а также различиями в характере осадков между двумя вегетационными периодами.В вегетационный период 2009 г. (с апреля по октябрь; Tharayil et al., 2011) выпало 720 мм осадков по сравнению с 606 мм в вегетационный период 2013 г. Кроме того, за последние 4 месяца вегетационного периода 2013 г. (с июля по октябрь) выпало вдвое меньше осадков, чем за этот период 2009 г. (210 мм и 428 мм соответственно). Большее количество осадков, полученных A. rubrum в течение вегетационного периода 2009 г., должно было привести к сходному физиологическому состоянию воды между обработками Ambient и Wet , что могло привести к одинаковому содержанию танинов между этими двумя обработками осаждения ( Тараил и др., 2011). В настоящем исследовании более скудные и менее равномерно распределенные осадки 2013 года, вероятно, подвергли Q. rubra в Ambient большему физиологическому водному стрессу, что может объяснить наблюдаемое сходство в содержании танина между обработками Ambient и Dry . .

Наряду с общим количеством дубильных веществ климат влиял как на состав мономеров, так и на среднюю степень полимеризации дубильных веществ — два параметра, которые редко исследуются, несмотря на их регулирующее влияние на потенциальную биологическую реактивность дубильных веществ (Zucker, 1983; Kraus et al. ., 2003б; Tharayil и др., 2011; Трибвассер и др., 2012). Реакционная способность CT является функцией модели гидроксилирования B-кольца, и танины с тригидрокси B-кольцами (PD) более реакционноспособны, чем танины с дигидрокси B-кольцом (PC). Обе обработки Wet и Dry , несмотря на их противоположное влияние на общее содержание СТ, снижали относительную долю единиц PD. По сравнению с PCs единицы PD образуются только на более поздних стадиях клеточного развития (Stafford et al., 1989).Таким образом, меньшее накопление ФД во влажном климате может указывать на метаболическую модификацию биосинтеза ХТ. В условиях метаболического стресса в условиях Dry трифенольные вицинальные гидроксилы предрасполагают PD к реакциям окисления и полимеризации (Close and McArthur, 2002; Aron and Kennedy, 2008), что приводит к снижению доли PD. Это может частично объяснить более низкую долю PD при обработке Dry , несмотря на более высокую продукцию CT. По сравнению с обработкой Ambient и Dry доля единиц PD и средняя степень полимеризации были выше при обработке Wet . Биологическая реактивность танинов зависит от степени их полимеризации, при этом танины с большей длиной цепи имеют более высокую способность образовывать комплексы с белками и осаждаться в них. Таким образом, хотя листья, которые были сформированы в условиях окружающей среды и обработаны Wet , имели более низкое количество танинов, эти танины будут иметь большую способность защищать травоядных из-за их более высокой биологической реактивности, чему способствует более высокая полимеризация и более высокая доля единиц PD. .Было показано, что условия окружающей среды влияют на степень полимеризации дубильных веществ (Cohen and Kennedy, 2010). Ранее сообщалось о более низкой полимеризации танинов в неоптимальных условиях выращивания (Tharayil et al., 2011) в стареющих листьях Acer rubrum с того же участка. Сообщается, что у Vitis vinifera стрессовые факторы окружающей среды, особенно дефицит влаги, повышают среднюю степень полимеризации танинов (Kennedy et al. , 2002; Cohen and Kennedy, 2010).У Onobrychis viciifolia влияние засухи на среднюю степень полимеризации ЦТ зависело от отогенеза растения (Malisch et al., 2016). Эти результаты показывают, что влияние окружающей среды на молекулярный состав дубильных веществ может регулироваться физиологическим стрессом, воспринимаемым растением (в отличие от величины применяемого воздействия), идентичностью видов, а также стадией их роста.

Распределение дубильных веществ в листьях сильно зависит от вида (Kraus et al., 2003a), а внутри вида клеточная локализация дубильных веществ, определяемая здесь как экстрагируемые растворителем и неэкстрагируемые таннины, может меняться в зависимости от условий окружающей среды (Gagné et al., 2006). В зеленых листьях ЦТ обычно хранятся в клеточных вакуолях (Stafford, 1988; Bussotti et al., 1998; Marles et al., 2003) и, таким образом, изолированы от потенциальных взаимодействий со структурным матриксом и метаболическими соединениями растений. Во время созревания листьев дубильные вещества проникают через клеточные стенки (Bussotti et al. , 1998), что может привести к увеличению доли танинов, связанных с волокнами. Эти комплексы могут защищать клеточную стенку или органеллу от микробной атаки, а также могут задерживать разложение после старения ткани (Zucker, 1983). Независимо от обработки нагреванием, листья после обработки Wet имели большую долю общего CT, которая не экстрагировалась во время последовательной экстракции растворителем. Хотя мы не можем быть уверены в точном комплексообразовании дубильных веществ, некоторые из них могут быть связаны с целлюлозой и пектином (Le Bourvellec et al., 2009; Padayachee et al., 2012a,b; Jakobek, 2015) в клеточных стенках и срединных пластинках. Наблюдалась высокая аффинность ПК к пектину (Le Bourvellec et al., 2009; Watrelot et al., 2013; Jakobek, 2015), что означает, что танины в обработке Wet с самым высоким процентом ПК и большей цепью -length может иметь большую способность к комплексообразованию с компонентами клеточной стенки. В качестве альтернативы, большая длина цепи и более высокая доля звеньев PC могли бы привести к более низкой экстрагируемости танинов из тканей листа, что привело бы к наблюдаемому более низкому содержанию танинов при обработках Wet . Кроме того, обработка Wet , несмотря на более низкое содержание CT, имеет более высокий процент HT, которые обладают более высокой способностью ингибировать ферменты по сравнению с CT (Triebwasser et al., 2012). Таким образом, в целом, листья, сформировавшиеся при обработке Wet , будут обладать сходным отпугивающим действием на травоядных благодаря танинам, несмотря на более низкое содержание ЦТ в ткани.

Климат повлиял на соотношение HTs и CTs. При большинстве обработок доминирующий тип танина в Q.rubra – ХТ, с меньшим содержанием ГТ. Ранее сообщалось о подобной, более низкой доле HT у видов красного дуба (Barbehenn et al., 2005). По сравнению с контролем Ambient * NoWarm , все климатические обработки имели более высокий процент HT, что может отражать простоту обслуживания, мобильность и большую отзывчивость HT по сравнению с CT (Zucker, 1983; Shure et al. , 1998). Поскольку HT в меньшей степени связаны со структурной матрицей растений, чем CT, они обладают меньшей устойчивостью к нормальному росту и размножению клеток, что делает их предпочтительным типом защитных соединений по сравнению с CT в средах, благоприятствующих активному росту растений (Zucker, 1983). о чем свидетельствует более высокий процент HT в обработках Wet .Также считается, что ГТ метаболически дешевле; метаболические затраты на образование проантоцианидина (мономеров ЦТ) составляют 0,395 АТФ-эквивалента г -1 , тогда как стоимость ГТ составляет 0,27 эквивалента г -1 (Lewis and Yamamoto, 1989).

Как галлотаннины, так и эллагитаннины также проявляют антиоксидантные свойства (Barbehenn et al., 2006) и, таким образом, могут играть роль в ингибировании образования высших радикалов в листьях, особенно в условиях климатического стресса. Эллагитаннины также могут сильно различаться по структуре (Zucker, 1983).Это может иметь особое значение для ингибирования пищеварительных ферментов в пищеварительном тракте травоядных (Zucker, 1983), что может быть эффективным защитным механизмом растения от травоядных. В большинстве климатических условий в этом исследовании зеленые листья демонстрировали более высокое содержание эллагитаннинов, однако контроль Ambient * No Warm имел самый высокий процент эллагитаннинов по сравнению со всеми другими вариантами обработки, что позволяет предположить, что изменение климата в любой Таким образом, можно значительно изменить пропорцию некоторых типов танинов, присутствующих либо за счет производительности, либо за счет использования определенных гидролизуемых структурных компонентов танинов, таких как молекула глюкозы (Zucker, 1983).

Во время старения тканей после разрушения связанных с мембраной везикул ЦТ могут образовывать нерастворимые комплексы с белками и углеводами клеточной стенки (Kraus et al., 2003a; Marles et al., 2003), что может способствовать увеличению процент неизвлекаемых КТ в стареющей ткани. Различия в содержании дубильных веществ в зеленых листьях по сравнению с стареющими листьями, наблюдаемые в этом исследовании, могут быть результатом различных общих стратегий резорбции растений. Учитывая их способность к комплексообразованию с белком, полимерную природу и связи С-С, CT менее поддаются катализу, опосредованному ферментами, и последующей резорбции.Из-за их меньшей сложности и наличия более лабильных сложноэфирных связей галлотаннины более подвержены резорбции во время старения тканей, чем ЦТ. По сравнению с зелеными тканями, большая мобилизация HT во время старения отражается в более низкой доле HT в стареющих тканях при лечении. Содержание CT в обработках Wet было одинаковым как в зеленых, так и в стареющих тканях, что в первую очередь можно отнести к большей степени полимеризации и большему содержанию PC в танинах, образующихся при этой обработке, что должно было привести к большей ассоциации эти дубильные вещества с клеточной стенкой.

Дубильные вещества могут образовывать комплексы с углеводами и белками, и это комплексообразование может сохраняться после старения листа, потенциально замедляя разложение. С увеличением CT и неэкстрагируемых CT для некоторых обработок это может означать, что эти листья будут разрушаться медленнее, терять меньше материала при выщелачивании и, возможно, обеспечивать более устойчивое поступление питательных веществ в почву. Более высокое содержание танина в листве, наблюдаемое в менее благоприятных условиях роста, может частично компенсироваться изменениями в схемах распределения на уровне деревьев, поскольку деревья, подверженные климатическому стрессу, часто производят меньше биомассы листьев.Однако снижение поступления углерода в результате подстилки в таких экосистемах в сочетании с более высоким содержанием фенольных соединений в этих тканях может в большей степени ограничивать круговорот питательных веществ в этих почвах. Экстрагируемые фенолы и дубильные вещества быстро теряются из листьев, что позволяет предположить, что выщелачивание является основным путем потери дубильных веществ из листьев (Benner et al. , 1988; Schofield et al., 1998; Hernes et al., 2001), а низкомолекулярные тяжелые танины теряются быстрее, чем танины с более высокой молекулярной массой (Schofield et al., 1998). Таким образом, обработка Wet с их СТ большей длины может лучше сохранять некоторые защитные свойства, связанные с танином, которые могут мешать процессам разложения. Однако на общие процессы травоядности и разложения влияет не только содержание антинутриентов в тканях, но и их общее содержание питательных веществ (Suseela et al., 2013; Almuzini et al., 2017), что, в свою очередь, также регулируется стрессорами окружающей среды.

В целом, наше исследование выявляет множество факторов, которые регулируют производство и сезонные изменения танинов в Q.рубра . В соответствии с гипотезой баланса питательных веществ концентрации танинов в тканях, образующихся в благоприятных климатических условиях, были ниже, но продуцируемые танины были более сложными и потенциально более защитными из-за большей длины цепи CT и большей доли HT. При воздействии климатического стресса Q. rubra реагировали производством большего количества танинов с более короткой длиной цепи. Дифференциальное влияние окружающей среды на динамику продукции растительных метаболитов важно в контексте глобальных изменений и обратных связей углеродного и азотного циклов.Хотя в более длительных масштабах времени климат изменяет экосистемные процессы посредством сдвигов в видовом составе, в более коротких временных масштабах физиологическая адаптация растений к изменяющемуся климату может влиять на содержание углерода в почве и круговорот питательных веществ посредством изменений химического состава биомассы. Эти изменения в содержании и составе танина могут изменить динамику леса не только за счет влияния на динамику разложения и круговорота питательных веществ, но и за счет регулирования динамики травоядных.

Профиль района Вашингтон-Хайтс / Инвуд – Центр Фурмана Нью-Йоркского университета

ДЕМОГРАФИЯ

В 2019 году в Вашингтон-Хайтс/Инвуде проживало около 204 096 человек, из которых 2. 5% населения идентифицированы как азиаты, 7,9% идентифицированы как черные, 67,9% идентифицированы как латиноамериканцы и 19,2% идентифицированы как белые.

Загрузка данных (Excel)

В 2019 году группа домохозяйств с наибольшей долей (22,9%) домохозяйств составляет от 60 001 до 100 000 долларов США. В 2000 году наибольшая доля (23,3%) домохозяйств приходилась на группу с доходом домохозяйства <= 20 000 долларов.

Загрузка данных (Excel)

Средний доход домохозяйства в 2019 году составлял 54 420 долларов, что примерно на 23% меньше, чем средний доход домохозяйства по городу (70 590 долларов).Уровень бедности в Вашингтон-Хайтс / Инвуд составлял 15,5% в 2019 году по сравнению с 16,0% по городу.

Загрузка данных (Excel)

КОРПУС

Арендаторы

Реальная медианная валовая арендная плата в Вашингтон-Хайтс/Инвуд увеличилась с 1070 долларов в 2006 году до 1340 долларов в 2019 году. В 2019 году 27,5% домохозяйств-арендаторов в Вашингтон-Хайтс/Инвуд были сильно обременены арендной платой (тратили более 50% дохода семьи на аренду). 47,8% сдаваемых в аренду единиц доступны по цене 80% среднего дохода по региону, что на 12 процентных пунктов ниже, чем в 2010 году.В 2020 году 2,5% сдаваемых в аренду единиц государственного жилья. Общий уровень вакантных площадей в Вашингтон-Хайтс / Инвуд составил 1,7%.

Загрузка данных (Excel)

Загрузка данных (Excel)

Домовладельцы

В 2019 году доля домовладельцев в Вашингтон-Хайтс/Инвуд составляла 10,5%, что ниже общегородской доли в 31,9%. Уровень домовладения в районе увеличился на 0,2 процентных пункта с 2010 года.В 2019 году ставка по кредиту на покупку жилья составляла 22,8 на 1000 объектов недвижимости (жилые дома на 1–4 семьи, кондоминиумы или кооперативные квартиры), а ставка по кредиту рефинансирования — 10,1 на 1000 объектов недвижимости по соседству. Из всех кредитов на покупку жилья впервые и кредитов на рефинансирование в Вашингтон-Хайтс / Инвуд 0,4% и 0,0% были кредитами с высокой стоимостью, соответственно. В 2020 году в Вашингтон-Хайтс / Инвуд были поданы заявления о лишении права выкупа ипотечного кредита в Северной Америке. Были инициированы иски о лишении права выкупа ипотечного кредита в Северной Америке на 1000 1-4 семейных объектов недвижимости и кондоминиумов.

Загрузка данных (Excel)

Развитие

Департамент строительства выдал новые сертификаты на право владения 22 жилыми единицами в новых зданиях в Вашингтон-Хайтс/Инвуд в прошлом году, что на 82 единицы меньше, чем количество единиц, сертифицированных в 2019 году.

Загрузка данных (Excel)

РАЙОННЫЕ УСЛУГИ И УСЛОВИЯ

Уровень тяжких преступлений составил 11,6 тяжких преступлений на 1000 жителей в 2020 году по сравнению с 11.6 тяжких преступлений на 1000 жителей города.

Загрузка данных (Excel)

границ | Наборы данных микробиома композиционны: и это не обязательно

1. Введение

Сбор и анализ наборов данных о микробиоме сопряжен с множеством проблем на этапах планирования исследования, сбора образцов, хранения и секвенирования, и они хорошо изучены (Robinson et al., 2016). Многие методы анализа наборов данных микробиома предполагают, что данные секвенирования эквивалентны экологическим данным, где количество прочтений, присвоенных организмам, часто нормализуется к постоянной площади или объему.Применяемые методы включают стратегии, основанные на подсчете, такие как несходство Брея-Кертиса, гауссовские модели с нулевым раздуванием и отрицательные биномиальные модели (McMurdie and Holmes, 2014; Weiss et al., 2017).

В экологическом исследовании возможно сосуществование многих различных видов, и их абсолютная численность может быть важна. Например, в районе, где обитают только тигры, важно знать, достаточен ли размер популяции для поддержания генетического разнообразия, необходимого для долгосрочного выживания (Shaffer, 1981). Однако обилие одного вида может не влиять на обилие другого; в этом районе могут обитать как тигры, так и божьи коровки, и ожидается, что миграция нескольких божьих коровок в этот район не повлияет на численность тигров.

Предположение об истинной независимости не может выполняться в экспериментах по секвенированию с высокой пропускной способностью (HTS), поскольку инструменты для секвенирования могут выполнять считывания только в пределах возможностей инструмента. Таким образом, правильно рассматривать эти инструменты как содержащие фиксированное количество слотов, которые должны быть заполнены.Возвращаясь к нашей аналогии с тигром и божьей коровкой, миграция божьих коровок в область, содержащую фиксированное количество уже заполненных слотов, должна вытеснить либо тигров, либо божьих коровок с занятых слотов. Эта аналогия без ограничений распространяется на любое количество таксонов и на любой инструмент с фиксированной мощностью (Aitchison, 1986; Lovell et al., 2011; Friedman and Alm, 2012; Fernandes et al. , 2013, 2014; Lovell et al. , 2015; Mandal et al., 2015; Gloor et al., 2016a,b; Gloor and Reid, 2016; Tsilimigras and Fodor, 2016).Таким образом, общее количество прочтений, наблюдаемое в ходе HTS, представляет собой случайную выборку фиксированного размера относительного обилия молекул в лежащей в основе экосистеме. Более того, подсчет не может быть связан с абсолютным количеством молекул во входном образце, как показано на рисунке 1. Это неявно подтверждается, когда наборы данных микробиома преобразуются в значения относительной численности, нормализованные подсчеты или разрежаются (McMurdie and Holmes, 2014; Weiss et al., 2017) до проведения анализа. Таким образом, количество полученных прочтений не имеет значения и содержит только информацию о точности оценки (Fernandes et al., 2013). Данные, которые естественным образом описываются как пропорции или вероятности, или с постоянной или нерелевантной суммой, называются композиционными данными. Композиционные данные содержат информацию об отношениях между частями (Aitchison, 1986; Pawlowsky-Glahn et al. , 2015).

Рисунок 1 . Данные высокопроизводительного секвенирования являются композиционными. (A) показывает, что данные, наблюдаемые после секвенирования набора нуклеиновых кислот из бактериальной популяции, не могут давать информацию об абсолютном количестве молекул.Количество отсчетов в наборе данных высокопроизводительного секвенирования (HTS) отражает долю отсчетов на признак (OTU, ген и т. д.) на образец, умноженную на глубину секвенирования. Поэтому доступны только относительные количества. Гистограммы в (B) показывают разницу между количеством молекул и пропорцией молекул для двух признаков, A (красный) и B (серый) в трех образцах. Верхние гистограммы показывают общее количество для трех образцов, а высота цвета иллюстрирует общее количество признаков.Когда три образца секвенированы, мы теряем информацию об абсолютном подсчете и получаем только относительное содержание, пропорции или «нормализованные подсчеты», как показано на нижней гистограмме. Обратите внимание, что признаки A и B в образцах 2 и 3 проявляются с одинаковым относительным обилием, даже несмотря на то, что количество в окружающей среде различно. В таблице ниже в (C) показаны реальные и предполагаемые изменения для каждого образца при переходе от одного образца к другому.

Данные о микробиоме, собранные с помощью высокопроизводительного секвенирования, часто изучаются в предположении, что секвенирование каким-то образом подсчитывает количество молекул, связанных с бактериями в популяции , как показано на верхней гистограмме на рисунке 1B.Мы можем увидеть разницу между подсчетами и составами, сравнив данные для фактических подсчетов для трех образцов на верхней гистограмме с их пропорциями на нижней гистограмме. Обратите внимание, что образцы 2 и 3 на рисунке 1B имеют одинаковые пропорциональные содержания, даже если они имеют разные абсолютные значения до секвенирования. Разница в кажущемся направлении изменения показана на рисунке 1C, и мы можем наблюдать, что взаимосвязь между абсолютной численностью в окружающей среде и относительной численностью после секвенирования непредсказуема.

2. Проблемы с текущими методами анализа

Мы кратко обрисуем проблемы, возникающие при изучении композиционных данных с использованием некомпозиционной парадигмы, проходя через обычные этапы анализа, показанные на рис. литературы в таких разнообразных областях, как экономика, геология и экология. Таким образом, вместо исчерпывающего объяснения проблем мы обозначим основную проблему и процитируем несколько полезных ресурсов.

Рисунок 2 . Стандартный набор инструментов для анализа микробиома и композиционные замены. Проиллюстрирован упрощенный стандартный рабочий процесс вычисления микробиома. Начальные этапы нормализации формально не эквивалентны, поскольку композиционные данные по своей сути «нормализованы», и нормализация количества прочтений не требуется. Остальные этапы функционально эквивалентны и заменяют композиционно подходящий подход вместо того, который таковым не является.

Очень сложно собрать одинаковое количество прочтений последовательности для каждого образца. Это может быть связано с различиями в платформах (например, MiSeq и HiSeq) или техническими трудностями при загрузке в прибор одинаковых молярных количеств библиотек для секвенирования, или из-за случайных вариаций. Общее количество наблюдаемых отсчетов (часто называемое глубиной считывания) является основным фактором, вмешивающимся в расчет расстояния или несходства для многомерных ординаций, полученных на основе этих расстояний (McMurdie and Holmes, 2014). Первоначальные попытки в области микробиома использовали «разрежение» или субдискретизацию количества прочтений каждого образца до общей глубины прочтений, чтобы попытаться исправить эту проблему (Lozupone et al., 2011; Вонг и др., 2016). Использование подвыборки подвергается сомнению, поскольку оно приводит к потере информации и точности (McMurdie and Holmes, 2014), и вместо этого рекомендуется практика нормализации подсчета из поля RNA-seq. Существует ряд используемых методов нормализации подсчета, и два из них: усеченное среднее M значений (TMM) (Robinson and Oshlack, 2010) и медианный метод (Anders and Huber, 2010) аналогичны преобразованиям логарифмических отношений. , но менее подходят для крайне асимметричных или разреженных наборов данных (Fernandes et al., 2013; Глор и др., 2016а). Эти преобразования нежелательны еще и потому, что количество отсчетов, наблюдаемых прибором, по своей конструкции не может содержать никакой информации о фактическом количестве молекул в окружающей среде, и поскольку исследователь, естественно, интерпретирует результаты как отсчеты, а не логарифмические отношения.

Одним из первых шагов традиционного анализа, следующих за нормализацией разрежения или подсчета, является вычисление матрицы расстояния или несходства (DD) на основе данных, которые используются для последующих анализов, таких как ординация и различение.Расстояния между объектами нелинейны при рассмотрении с евклидовой точки зрения (Martín-Fernández et al., 1998; Aitchison et al., 2000), и многие матрицы DD частично решают эту проблему. Как отмечалось выше, общее количество прочтений в образце является сильной искажающей переменной для всех этих методов, указывая на то, что состав образца не является основным измеряемым свойством. Однако, по-видимому, полезные матрицы DD могут быть сгенерированы после нормализации. В литературе преобладают три матрицы DD; UniFrac (взвешенный и невзвешенный варианты) (Lozupone et al., 2011), расхождение Брея-Кертиса и Дженсена-Шеннона, и хотя все они имеют свое применение, они не учитывают составной характер данных. Следует отметить, что метод взвешенного расстояния UniFrac позволяет получить важную филогенетическую информацию, и недавно была разработана композиционная замена (Silverman et al., 2017).

В основном матрицы DD используются для ординации и кластеризации. Здесь становятся очевидными недостатки этих методов DD. В дополнение к тому, что они чувствительны к общей глубине чтения выборки, методы DD в значительной степени различают выборки на основе наиболее относительно распространенных признаков в выборках, а не признаков, которые обязательно наиболее вариабельны между выборками (Горвитовская и др., 2016; Вонг и др., 2016). Это может привести к тому, что расположение образцов в ординации резко изменится при включении или исключении различных признаков из набора данных, а также к недостаточной чувствительности при выявлении образцов с выбросами (Wong et al. , 2016).

Серьезные проблемы с корреляцией данных о составе были впервые отмечены на заре статистической практики Пирсоном (1897) и вновь обнаружены в контексте исследований микробиома (Lovell et al., 2011; Friedman and Alm, 2012; Lovell et al., 2015; Курц и др., 2015; Мортон и др., 2017). К сожалению, эффект нельзя ослабить, как было рекомендовано (Weiss et al., 2016). Понимание того, что существует проблема корреляции, имеет решающее значение, поскольку неограниченная корреляция или ковариация являются ключевыми понятиями для ординации, кластеризации, сетевого анализа и определения дифференциальной (относительной) численности. Композиционные данные имеют отрицательное смещение корреляции и другую структуру корреляции, чем базовые данные подсчета. Хуже того, композиционные данные демонстрируют ложную корреляцию при подмножестве или агрегировании.Раздел «Корреляция» в Приложении показывает, что корреляция не является надежным или воспроизводимым индикатором базовых данных при работе с композиционными данными.

Наконец, дифференциальные (относительные) показатели численности не учитывают состав (Fernandes et al., 2013; Mandal et al., 2015; Gloor et al., 2016a). Крупномасштабный бенчмаркинг инструментов показал, что широко используемые инструменты дифференциального (относительного) изобилия чувствительны к разреженности (Thorsen et al., 2016) и, следовательно, демонстрируют неприемлемо высокий уровень ложноположительных результатов идентификации (Hawinkel et al., 2017).

Таким образом, анализ композиционных данных с использованием современных протоколов имеет несколько проблем. Однако, как показано ниже, эти проблемы могут быть удовлетворительно решены с помощью инструментов, учитывающих композиционный характер данных.

3. Анализ HTS с использованием методов CoDa

Наборы композиционных данных из HTS могут быть тщательно проанализированы путем адаптации инструментов из других областей (Van den Boogaart and Tolosana-Delgado, 2013; Pawlowsky-Glahn et al., 2015) и использования новых инструментов, основанных на тех же основных принципах (Fernandes). и другие., 2013; Эрб и Нотредам, 2016 г.; Сильверман и др., 2017; Куинн и др., 2017). В настоящее время в литературе есть примеры, которые дают рекомендации о том, как проводить некоторые или все эти анализы наборов данных HTS, включая мета-транскриптомику (Macklaim et al., 2013) и секвенирование тегов (McMurrough et al., 2014; Bian et al. др., 2017). Ниже мы кратко рассмотрим подходы.

Отправной точкой для любого композиционного анализа является преобразование соотношения данных. Преобразования отношений фиксируют отношения между объектами в наборе данных, и эти отношения одинаковы, независимо от того, являются ли данные числами или пропорциями.Логарифмирование этих отношений, то есть логарифмических отношений, делает данные симметричными и линейно связанными и помещает данные в координатное пространство логарифмических отношений (Павловски-Глан и др., 2015). Таким образом, мы можем получить информацию о логарифмическом отношении распространенности признаков по отношению к другим признакам в наборе данных, и эта информация напрямую связана с окружающей средой. Мы не можем получить информацию об абсолютном содержании, поскольку эта информация теряется в процессе секвенирования, как показано на рисунке 1.Однако у логарифмических отношений есть хорошее математическое свойство, заключающееся в том, что их выборочное пространство представляет собой действительные числа, и это представляет собой большое преимущество для применения стандартных статистических методов, разработанных для реальных случайных величин.

Часто используется преобразование центрированного логарифмического отношения (clr), введенное Aitchison (1986). Учитывая вектор наблюдения D «подсчитанных» признаков (таксонов, операционных таксономических единиц или OTU, генов и т. д.) в выборке, x = [ x 1 , x 2 , … x D ], преобразование clr для выборки можно получить следующим образом:

xclr=[log(x1/G(x)),log(x2/G(x))…log(xD/G(x))],G(x)= x1·x2·…·xDD    (1)

G ( x ) — это среднее геометрическое x . Преобразованные значения clr можно использовать в качестве входных данных для многомерной проверки гипотез с использованием таких инструментов, как MANOVA, регрессия и т. д. (Van den Boogaart and Tolosana-Delgado, 2013), а также для построения моделей. Значения, преобразованные с помощью clr, не зависят от масштаба; то есть ожидается, что такое же отношение будет получено в выборке с небольшим числом прочтений или в идентичной выборке с большим количеством прочтений, влияет только точность оценки clr. Это подробно описано в разделе «Вероятность» и «Логарифмические преобразования» в Приложении, но следствием этого является то, что нормализация счета не нужна и даже нежелательна, поскольку теряется информация о точности.

G ( x ) не может быть определен для разреженных данных без удаления, замены или оценки нулевых значений счета. К счастью, существуют приемлемые методы работы с нулевыми значениями счета как в виде точечных оценок с использованием пакета zCompositionsR (Palarea-Albaladejo and Martín-Fernández, 2015), так и в виде распределения вероятностей с использованием ALDEx2, доступного на Bioconductor. Преобразование одной оценки в вектор вероятности перед преобразованием clr дает масштабно-инвариантную меру, поскольку она учитывает точность оценки вероятностей для каждого признака; мы отсылаем продвинутых читателей к более технической литературе (Jaynes and Bretthorst, 2003; Fernandes et al., 2013; Gloor et al., 2016a) и раздел «Вероятность» Приложения для получения дополнительной информации.

Существуют композиционные замены для определения расстояния, которые используются для кластеризации и ординации. Первый — это филогенетическое преобразование philr (и R-пакет), основанное на балансах (бинарных разделах) вдоль эволюционного дерева (Silverman et al., 2017), которое заменяет знакомую метрику расстояния UniFrac. Расстояния, определяемые филогенетическими преобразованиями, имеют то преимущество, что выбранные бинарные разбиения имеют простую интерпретацию и полностью учитывается корреляционная структура данных.Однако недостатком является то, что можно исследовать только отношения между выбранными разделами. Вторым показателем расстояния является расстояние Эйтчисона, которое является просто евклиевым расстоянием между образцами после преобразования clr, а расстояния между образцами такие же, как филогенетические ilr. Расстояние Эйтчисона превосходит как широко используемые показатели дивергенции Дженсена-Шеннона, так и показатели несходства Брея-Кертиса, будучи более устойчивым к подмножеству и агрегированию данных и являясь истинным линейным расстоянием (Aitchison et al., 2000).

Заменой исследованию β-разнообразия данных микробиома является двойная диаграмма главного компонента состава (PCA) на основе дисперсии (Aitchison, 1983; Aitchison and Greenacre, 2002), где можно наблюдать взаимосвязь между дисперсией между OTU и расстоянием выборки (Gloor и др., 2016b). Композиционная двойная диаграмма имеет несколько преимуществ по сравнению с диаграммами главных координат (PCoA) для анализа β-разнообразия. Полученные результаты очень стабильны, когда данные разделены на подмножества (Bian et al. , 2017), что означает, что исследовательский анализ определяется не просто отношениями присутствия-отсутствия в данных или чрезмерной разреженностью (Wong et al., 2016; Morton et al., 2017). Графики PCA могут быть значительно более воспроизводимыми, поскольку они не зависят от предполагаемого базового дерева, которое может потребоваться регенерировать с каждым подмножеством данных или когда необходимо включить новые таксоны. Эта простота облегчает исследовательский анализ данных. Композиционные двойные диаграммы PCA отображают отношения между OTU и расстояниями между образцами на общем графике.С помощью этого инструмента можно получить существенную качественную информацию о качестве набора данных и отношениях между группами (Aitchison and Greenacre, 2002; Gloor et al., 2016b), и примеры показаны в разделе «Диаграммы» Приложения. .

Как отмечалось выше, корреляция ненадежна в композиционных наборах данных из-за смещения отрицательной корреляции и нестабильности корреляции с подмножеством данных. Более подробно это объясняется в приложении (Pearson, 1897; Aitchison, 1986), но эти проблемы наблюдаются при использовании всех некомпозиционных методов корреляции (Ortego and Egozcue, 2013).К сожалению, корреляция не может быть подвергнута принципиальному процессу для определения оптимального метода, как это недавно пропагандировалось (Weiss et al., 2016).

Существует несколько более строгих подходов, которые можно применять для анализа корреляции в наборах данных микробиома, включая SPARCC (Friedman and Alm, 2012) и SPieCeasi (Kurtz et al., 2015), оба из которых предполагают разреженную матрицу данных, а ϕ (Lovell et al., 2015) и ρ (Erb and Notredame, 2016) (опубликованные версии которых требовали неразреженной матрицы).Эти две последние метрики были включены в пакет R propr, который включает в себя адаптацию, позволяющую вычислять метрики с разреженными данными, которые дают ожидаемое значение ρ (E(ρ)), которое приближается к 1, если две функции имеют точно постоянную соотношения в данных (Lovell et al. , 2015; Quinn et al., 2017). На дополнительном рисунке 2 показано, что ожидаемое значение ρ гораздо более устойчиво к подмножеству, чем известные метрики корреляции, и становится более воспроизводимым, когда значение E (ρ) приближается к 1, что указывает на большую точность оценки по мере того, как корреляция становится сильнее.Однако определение оптимального и общего подхода к корреляции в композиционных наборах данных является открытой исследовательской проблемой. Дополнительные рисунки 2–5 содержат более расширенное объяснение проблемы корреляции и использование E (ρ) в качестве предлагаемого решения.

Дифференциальное (относительное) количество OTU между группами в данных о составе часто исследуется с помощью специально разработанных инструментов, которые сравнивают разницу в относительном количестве между образцами, и недавно были предложены инструменты, адаптированные из домена RNA-seq.К сожалению, эти подходы не учитывают композиционный характер данных и поэтому могут быть особенно чувствительны к смещению отрицательной корреляции и большой изменчивости таких наборов данных (Fernandes et al. , 2013). Действительно, бенчмаркинг показывает, что традиционные инструменты демонстрируют разные уровни ложных срабатываний с разным уровнем разреженности (Thorsen et al., 2016) и что показатели ложных срабатываний могут быть в 20 раз выше, чем ожидалось (Hawinkel et al., 2017).

Доступны инструменты

, основанные на приблизительной композиционной основе.Инструмент ANCOM выполняет статистические тесты точечных оценок данных, преобразованных с помощью аддитивного логарифмического отношения, где в качестве знаменателя выбраны (предположительно) инвариантные таксоны (Mandal et al., 2015). ANCOM включается в популярный набор инструментов анализа микробиома QIIME (Weiss et al., 2017). Инструмент ALDEx2 выполняет статистические тесты значений clr из смоделированного распределения вероятностей набора данных (дополнительные уравнения данных 1–4) и сообщает ожидаемые значения параметрических и непараметрических статистических тестов вместе с оценками размера эффекта.Этот подход сводит проблему ложноположительной идентификации почти к нулю в реальных и смоделированных наборах данных микробиома с небольшим влиянием на чувствительность (Thorsen et al. , 2016) и, по наблюдениям, относительно нечувствителен к изменениям, когда данные разделены на подмножества (Fernandes et al. , 2014). В литературе есть много примеров его использования (Macklaim et al., 2013; McMurrough et al., 2014; Bian et al., 2017) и в Приложении.

Таким образом, анализ данных о составе традиционными методами может дать удовлетворительные результаты.Однако эти результаты могут вводить в заблуждение и быть непредсказуемыми. Композиционно подходящие инструменты существуют в качестве замены на каждом этапе анализа, как показано на рисунке 2, и заинтересованные читатели могут обратиться к дополнительным и другим опубликованным примерам (Macklaim et al., 2013; Fernandes et al., 2014; McMurrough et al., 2014; Lovell et al., 2015; Mandal et al., 2015; McMillan et al., 2015; Gloor and Reid, 2016; Gloor et al., 2016b; Bian et al., 2017; Silverman et al. и др., 2017; Куинн и др., 2017), и аналогичный анализ соответствия, реализованный в пакете phyloseq (McMurdie, Holmes, 2013).

Вклад авторов

г.г. задумал и написал первоначальный вариант рукописи. JM задумал и сделал рисунки 1, 2. JM, JE и VP-G отредактировали черновик. Все авторы согласились с содержанием окончательной версии.

Финансирование

Работа GG и JM была поддержана грантом RGPIN-03878-2015 Национального совета по науке и инженерным исследованиям, а также финансированием Программы агроинноваций Министерства сельского хозяйства и агропродовольствия.VP-G и JE признают финансовую поддержку Министерства образования и науки Испании в рамках проекта CODA-RETOS (Ref. MTM2015-65016-C2-1 (2)-R (MINECO/FEDER,UE)).

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www. frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2017.02224/full#supplementary-material

Ссылки

Эйчисон, Дж. (1983). Анализ главных компонент композиционных данных. Биометрика 70, 57–65. doi: 10.1093/биомет/70.1.57

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Эйчисон, Дж. (1986). Статистический анализ композиционных данных . Лондон: Чепмен и Холл.

Академия Google

Эйчисон, Дж., Барсело-Видаль, К., Мартин-Фернандес, Дж. А., и Павловски-Глан, В. (2000). Анализ логарифмов и композиционное расстояние. Матем. геол. 32, 271–275. дои: 10.1023/A:1007529726302

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Эйчисон, Дж., и Гринакр, М. (2002). Биграфы композиционных данных. Дж. Рой. Стат. соц. сер. С 51, 375–392. дои: 10.1111/1467-9876.00275

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Биан Г., Глор Г. Б., Гонг А., Цзя К., Zhang, W., Hu, J., et al. (2017). Микробиота кишечника здоровых пожилых китайцев аналогична микробиоте здоровых молодых людей. mSphere 2: e00327–17. doi: 10.1128/mSphere.00327-17

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Фернандес, А. Д., Маклейм, Дж. М., Линн, Т., Рид, Г., и Глор, Г. Б. (2013). ANOVA-подобный анализ дифференциальной экспрессии (ALDEx) для смешанной популяции РНК-seq. PLoS ONE 8:e67019.

Реферат PubMed | Академия Google

Фернандес, А.Д., Рид, Дж. Н., Маклейм, Дж. М., Макмерроу, Т. А., Эджелл, Д. Р., и Глор, Г. Б. (2014). Унификация анализа наборов данных высокопроизводительного секвенирования: характеристика РНК-секвенирования, секвенирования гена 16S рРНК и экспериментов по селективному росту с помощью композиционного анализа данных. Микробиом 2, 15.1–15.13. дои: 10.1186/2049-2618-2-15

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Глор, Г. Б., Маклейм, Дж. М. , Ву, М., и Фернандес, А. Д. (2016a). Неопределенность состава не следует игнорировать при высокопроизводительном анализе данных секвенирования. австр. Дж. Стат. 45, 73–87. дои: 10.17713/ajs.v45i4.122

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Глор, Г. Б., и Рид, Г. (2016). Композиционный анализ: действенный подход к анализу данных высокопроизводительного секвенирования микробиома. Кан. Дж. Микробиол. 62, 692–703. doi: 10.1139/cjm-2015-0821

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Глор, Г. Б., Ву, Дж. Р., Павловски-Глан, В., и Эгоскью, Дж. Дж. (2016b). Все относительно: анализировать данные микробиома как композиции. Энн. Эпидемиол. 26, 322–329. doi: 10.1016/j.annepidem.2016.03.003

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Горвитовская, А., Холмс, С.П., и Хьюз, С.М. (2016). Интерпретация превотеллы и бактероидов как биомаркеров диеты и образа жизни. Микробиом 4:15. doi: 10.1186/s40168-016-0160-7

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хавинкель С., Маттьелло Ф., Бийненс Л. и Тас О. (2017).Нарушенное обещание: методы дифференциальной численности микробиома не контролируют частоту ложных открытий. Кратко. биоинф. ббх104. doi: 10.1093/bib/bbx104

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Джейнс, Э. Т., и Бреттхорст, Г. Л. (2003). Теория вероятностей: логика науки . Кембридж, Великобритания: Издательство Кембриджского университета

Академия Google

Kurtz, Z.D., Müller, C.L., Miraldi, E.R., Littman, D.R., Blaser, M.J., and Bonneau, R.А. (2015). Разреженный и композиционно надежный вывод о микробных экологических сетях. PLoS вычисл. биол. 11:e1004226. doi: 10.1371/journal.pcbi.1004226

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ловелл, Д., Мюллер, В., Тейлор, Дж. , Цварт, А., и Хеллиуэлл, К. (2011). «Пропорции, проценты, части на миллион: правильно ли молекулярные биологические науки обрабатывают данные о составе», в Compositional Data Analysis: Theory and Applications , под редакцией В. Павловски-Глана и А.Буччианти (Лондон: John Wiley & Sons, Ltd.), 193–207.

Академия Google

Ловелл, Д., Павловски-Глан, В., Эгоскью, Дж. Дж., Маргерат, С., и Белер, Дж. (2015). Пропорциональность: достойная альтернатива корреляции относительных данных. PLoS вычисл. биол. 11:e1004075. doi: 10.1371/journal.pcbi.1004075

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лозупоне, К., Лладсер, М.Е., Найтс, Д., Стомбах, Дж., и Найт, Р. (2011).Unifrac: эффективная метрика расстояния для сравнения микробного сообщества. ISME J. 5, 169–172. doi: 10.1038/ismej.2010.133

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Маклейм, М. Дж., Фернандес, Д. А. , Ди Белла, М. Дж., Хаммонд, Дж.-А., Рейд, Г., и Глор, Г. Б. (2013). Сравнительная мета-РНК-секвенация вагинальной микробиоты и дифференциальная экспрессия Lactobacillus iners в норме и при дисбиозе. Микробиом 1:15. дои: 10.1186/2049-2618-1-12

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Мандал С., Ван Треурен В., Уайт Р. А., Эггесбё М., Найт Р. и Педдада С. Д. (2015). Анализ состава микробиомов: новый метод изучения микробного состава. Микроб. Экол. Здоровье Дис. 26:27663. дои: 10.3402/mehd.v26.27663

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Мартин-Фернандес, Х., Барсело-Видаль, К., Павловски-Глан, В., Буччианти А., Нарди Г. и Потенца Р. (1998). Меры различия для композиционных данных и методы иерархической кластеризации. Проц. ИАМГ . 98, 526–531.

Макмиллан, А., Рулиса, С., Сумара, М., Маклейм, Дж. М., Рено, Дж., Бизанц, Дж. Э., и соавт. (2015). Мультиплатформенный подход к метаболомике идентифицирует высокоспецифичные биомаркеры бактериального разнообразия во влагалище беременных и небеременных женщин. науч. 5, 14174. doi: 10.1038/srep14174

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Макмерди, П.Дж. и Холмс С. (2013). phyloseq: пакет r для воспроизводимого интерактивного анализа и графики данных переписи микробиома. PLoS ONE 8:e61217. doi: 10.1371/journal.pone.0061217

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Макмерди, П.Дж., и Холмс, С. (2014). Не тратить, не хотеть: почему недопустимо разрежение данных о микробиоме. PLoS вычисл. биол. 10:e1003531. doi: 10.1371/journal.pcbi.1003531

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Макмерроу, Т.А., Диксон, Р.Дж., Тиберт, С.М.Ф., Глор, Г.Б., и Эджелл, Д.Р. (2014). Контроль каталитической эффективности с помощью коэволюционирующей сети каталитических и некаталитических остатков. Проц. Натл. акад. науч. США 111, E2376–E2383. doi: 10.1073/pnas.1322352111

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Мортон, Дж. Т., Торан, Л., Эдлунд, А., Меткалф, Дж. Л., Лаубер, К., и Найт, Р. (2017). Раскрытие эффекта подковы в микробиологических анализах. mSystems 2:e00166–16.doi: 10.1128/mSystems.00166-16

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ортего, М. И., и Эгоскью, Дж. Дж. (2013). «Ложные связки», в материалах 5-го семинара по анализу композиционных данных, CoDaWork 2013 (Vorau).

Академия Google

Палеа-Альбаладехо, Дж., и Мартин-Фернандес, Дж. А. (2015). zCompositions — пакет R для многомерного вменения цензурированных слева данных в рамках композиционного подхода. Химометр.Интел. лаборатория Сист. 143, 85–96. doi: 10.1016/j.chemolab.2015.02.019

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Павловски-Глан, В., Эгоскью, Дж. Дж., и Толосана-Дельгадо, Р. (2015). Моделирование и анализ композиционных данных. Лондон: John Wiley & Sons.

Академия Google

Пирсон, К. (1897 г.). Математические вклады в теорию эволюции. – о форме ложной корреляции, которая может возникнуть при использовании индексов при измерении органов. Проц. Рой. соц. Лонд. 60, 489–498

Академия Google

Куинн, Т., Ричардсон, М.Ф., Ловелл, Д., и Кроули, Т. (2017). propr: R-пакет для определения пропорционально обильных признаков с использованием композиционного анализа данных. биоРксив . дои: 10.1101/104935

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Робинсон, С.К., Бротман, Р.М., и Равель, Дж. (2016). Сложности оценки микробиома человека в эпидемиологических исследованиях. Энн.Эпидемиол. 26, 311–321. doi: 10.1016/j.annepidem.2016.04.005

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Робинсон, доктор медицины, и Ошлак, А. (2010). Метод нормализации масштабирования для анализа дифференциальной экспрессии данных РНК-секвенирования. Геном Биол. 11, Р25.1–Р25.9. doi: 10.1186/gb-2010-11-3-r25

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Шаффер, М.Л. (1981). Минимальные размеры популяции для сохранения вида. BioScience 31, 131–134.

Академия Google

Сильверман, Дж. Д., Уошберн, А. Д., Мукерджи, С., и Дэвид, Л. А. (2017). Филогенетическое преобразование улучшает анализ данных о составе микробиоты. Элиф 6:21887. doi: 10.7554/eLife.21887

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Thorsen, J., Brejnrod, A., Mortensen, M., Rasmussen, M.A., Stokholm, J., Al-Soud, W.A., et al. (2016). Крупномасштабный бенчмаркинг выявляет ложные открытия и подсчитывает чувствительность к трансформации в методах анализа данных ампликона гена 16S рРНК, используемых в исследованиях микробиома. Микробиом 4, 62. doi: 10.1186/s40168-016-0208-8

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Tsilimigras, MCB, and Fodor, A. A. (2016). Композиционный анализ данных микробиома: основы, инструменты и проблемы. Энн. Эпидемиол. 26, 330–335. doi: 10.1016/j.annepidem.2016.03.002

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ван ден Бугаарт, К.Г., и Толосана-Дельгадо, Р. (2013). Анализ данных о составе с помощью R , Лондон, Великобритания: Springer.

Академия Google

Weiss, S., Van Treuren, W., Lozupone, C., Faust, K., Friedman, J., Deng, Y., et al. (2016). Стратегии обнаружения корреляции в наборах микробных данных сильно различаются по чувствительности и точности. ISME J. 10, 1669–1681. doi: 10.1038/ismej.2015.235

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Вайс, С., Сюй, З. З., Педдада, С., Амир, А., Bittinger, K., Gonzalez, A., et al. (2017). Стратегии нормализации и дифференциальной численности микробов зависят от характеристик данных. Микробиом 5, 27. doi: 10.1186/s40168-017-0237-y

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Коды ТН ВЭД САМОЛЕТЫ, КОСМИЧЕСКИЕ АППАРАТЫ И ИХ ЧАСТИ

Представленная здесь информация является частью онлайн-тренинга по импорту и экспорту

 

Глава 88 САМОЛЕТЫ, КОСМИЧЕСКИЕ АППАРАТЫ И ИХ ЧАСТИ

Нажмите здесь, чтобы ознакомиться с базовым руководством по коду HS (код HST)

Как найти иностранного покупателя? Несколько советов, как привлечь зарубежных покупателей


Нажмите здесь, чтобы узнать код ТН ВЭД другого продукта/товара

 


Экспорт и импорт АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ АППАРАТОВ И ЗАПЧАСТЕЙ .

В этой статье упоминаются коды Гармонизированной системы (Гармонизированная тарифная система – HTS)   для АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ АППАРАТОВ и ЗАПЧАСТЕЙ, которые помогут вам в экспорте и импорте АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ АППАРАТОВ и ЗАПЧАСТЕЙ . Эти коды помогают экспортерам и импортерам во всем мире узнать код классификации продуктов, который в каждой стране называется по-разному, например, График B, ITC, HS, HTS, Тарифный код и т. д.

Например, если вам необходимо экспортировать или импортировать АВИАЦИОННЫЕ, КОСМИЧЕСКИЕ КОРАБЛИ И ЗАПЧАСТИ из/в любую страну, таможенный департамент и другие государственные и неправительственные учреждения соответствующей страны идентифицируют ваш продукт на основе согласованного системного кода.Если вы импортируете или экспортируете АВИАЦИОННЫЕ, КОСМИЧЕСКИЕ КОРАБЛИ и ЗАПЧАСТИ, 6-значный гармонизированный системный код, упомянутый в этой статье, принимается во всем мире. Другими словами, экспорт и импорт АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ КОРАБЛЕЙ и ЗАПЧАСТЕЙ классифицируются по продуктам в соответствии с информацией, упомянутой здесь. Эти гармонизированные системные коды (коды ГС) представлены в этом веб-блоге в систематическом порядке, чтобы вам было легче их понять и идентифицировать. Я надеюсь, что информация в этой статье поможет вам для беспрепятственного импорта или экспорта АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ АППАРАТОВ и ЗАПЧАСТЕЙ

.

 

8801 воздушные шары и дирижабли, планеры и т. д.

880110 Планеры и дельтапланы

880190 Прочие немоторные летательные аппараты

 

8802 самолеты, двигатели, космические аппараты и ракеты-носители

880211 Вертолеты С массой без груза не более 2 000 кг

880212 Вертолеты С массой без груза более 2000 кг

880220 Самолеты и другие летательные аппараты, с массой без груза не более 2 000 кг

880230 Самолеты и другие летательные аппараты с массой без груза более 2 000 кг, но не более 15 000 кг

880240 Самолеты и другие летательные аппараты с массой без груза более 15 000 кг

880250 Космические аппараты (включая спутники) и ракеты-носители космических аппаратов

 

 

8803 части воздушных шаров и т. д., самолетов, космических кораблей и т. д.

880310 гребные винты и роторы и их части

880320

Ходовая часть и ее части

880330 Прочие части самолетов или вертолетов

880390 Прочее

 

8804 парашюты (включая управляемые парашюты) роточ

880400 Парашюты (включая управляемые парашюты) и ротошюты; части и принадлежности к ним

 

8805 стартовое устройство для самолетов, палубное крепление, летающие тренажеры grd, pt

880510 Стартовое устройство самолета и его части; палубный предохранитель или подобное устройство и его части

880520 Наземные летные тренажеры и их части

 

В этом посте я упомянул коды ТН ВЭД, которые помогают экспортерам и импортерам АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ АППАРАТОВ и ЗАПЧАСТЕЙ. Эти коды ГС помогают экспортерам и импортерам АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ КОРАБЛЕЙ и ЗАПЧАСТЕЙ идентифицировать свою продукцию для использования в таможенных органах и других государственных и неправительственных учреждениях при импорте или экспорте АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ КОРАБЛЕЙ и ЗАПЧАСТЕЙ. Я надеюсь, что информация в этом посте поможет экспортерам и импортерам АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ КОРАБЛЕЙ и ЗАПЧАСТЕЙ. Покупатели АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ АППАРАТОВ и ЗАПЧАСТЕЙ, а также продавцы АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ АППАРАТОВ и ЗАПЧАСТЕЙ в импортно-экспортной торговле могут использовать коды ТН ВЭД, упомянутые в этом посте.Обратите внимание, что поставщики АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ АППАРАТОВ и ЗАПЧАСТЕЙ, а также покупатели АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ АППАРАТОВ и ЗАПЧАСТЕЙ в международной торговле могут добавить две или четыре цифры к этим кодам ГС правительством соответствующей страны. Таким образом, экспортеры или импортеры АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ СУДОВ и ЗАПЧАСТЕЙ могут следовать такому дополнению, если таковое имеется, после сверки с правилами и положениями соответствующей страны. Вскоре я напишу   о том, как экспортировать САМОЛЕТЫ, КА и ЗАПЧАСТИ, а также как импортировать САМОЛЕТЫ, КА и ЗАПЧАСТИ.Также можно отметить покупателей АВИАЦИОННЫХ, КОСМИЧЕСКИХ АППАРАТОВ и ЗАПЧАСТЕЙ и продавцов АВИАЦИОННЫХ, КА и ЗАПЧАСТЕЙ в экспортно-импортной торговле, классификация товаров именуется по-разному в каждой стране путем добавления двух или четырех цифр вместе с кодами ТН ВЭД. Например, в США (Соединенные Штаты) классификация называется «Приложение B», а в Индии — «номер ITC (номер индийского тарифного кода). Надеемся, что эта статья поможет импортерам САМОЛЕТОВ, КА и ЗАПЧАСТЕЙ, а также экспортерам САМОЛЕТОВ, КА и ЗАПЧАСТЕЙ .   Напишите ниже свои мысли. Нажмите здесь, чтобы узнать код ТН ВЭД другого продукта/товара

Вышеуказанная информация является частью онлайн-обучения по экспорту-импорту

Сообщения о зарубежной торговле онлайн

Нажмите здесь, чтобы узнать ставку GST на товары и услуги

Список освобожденных от GST товаров и услуг

Найти номер HSN или код тарифа услуги для GST

Руководство по регистрации GST

Законы Индии о налоге на товары и услуги

Как экспортировать ваши товары?

Нажмите здесь, чтобы ознакомиться с основным руководством по коду HS (код HST)    Как найти иностранного покупателя? , Разница между кодом ГС и тарифным кодом Индии ITC , Разница между Приложением B, кодом ГС и кодом ITC , : Как урегулировать спор Процедуры импорта оформления и формальности Bank Finance для экспортеров в качестве предварительной отгрузки Финансы Советы на экспортеры на документацию Что такое юридические документы в экспорте Нажмите здесь, чтобы узнать индийский тарифный код (ITC)   Что такое уведомление об отгрузке и содержание уведомления об отгрузке   Разница между базовым и фидерным судном   Разница между FCL и LCL Как урегулировать спор при экспорте и импорте?Процедуры оформления импорта и формальностиРазница между MBL и HBL. Как работает MBL и как работает HBL? Нажмите здесь, чтобы узнать код ТН ВЭД другого продукта t /товар

Читайте также;

Как экспортировать ваш продукт?
Как импортировать ваш продукт?
Нажмите здесь, чтобы узнать код ТН ВЭД вашего продукта
Что такое код ITC (Индийский тарифный код) вашего продукта?
12 Основные риски и решения при импорте и экспорте
Размеры экспортных контейнеров

Требуется ли БОРТОВОЙ СЕРТИФИКАТ для переговоров по аккредитиву
 Что такое экзамен VACIS при таможенном оформлении импорта в США
 Когда экспортер может предоставить коносамент от судоходной компании?
Как работает банковский перевод в международном бизнесе?
Импорт текстиля и текстильных изделий
 Правила ввоза искусственных штапельных волокон
Как ввозить трикотажные или вязаные ткани  
Как таможня рассчитывает калькуляционную стоимость для импорта?
Разница между обычным сухим контейнером и контейнером половинной высоты
 Советы по импорту растительных текстильных волокон, пряжи
 Как импортировать искусственные нити, пряжу  
 Как подается IGM при продаже в открытом море?
Возможность передачи коносамента
Как заказать порожний контейнер для заводской/CFS/ICD/портовой стаффировки
Как рассчитать CBM в экспортных отгрузках LCL:
Является ли THC одинаковым во всех портах
ВИДЫ УБЫТКОВ в морском страховании
Типы экспортных контейнеров
Размеры грузовых контейнеров
Переключатель BL
ТИПЫ МОРСКИХ СТРАХОВЫХ ПОЛИСОВ Отозванное освобождение от ССЗ на портативный рентгеновский аппарат / систему, Бюджет 2014 г. Паспорт безопасности материалов MSDS
Текстильная декларация нескольких стран
Процедуры согласования и формальности экспортных счетов
Материал, используемый для тестирования, имеет право на Modvat
Способы платежей в международной торговле
Что такое экзамен VACIS при таможенном оформлении импорта в США
Когда экспортер может выпустить разрешение коносамент от транспортной компании?
Процедуры для реимпорта
Процедуры для требования возвратной нормы возврата
Знакомство с этим веб-сайтом.
Является ли авианакладная правоустанавливающим документом?
Морские перевозчики
В чем разница между BAF и CAF
Стаффинг и Дестаффинг – 2 обычных термина, используемых в судоходстве
Сдача коносамента – некоторые факты Коносамент
USDA, удерживаемый таможней США для импортных грузов
 Способы импорта Древесины и изделий из дерева, древесного угля       
 Процедуры импорта меховых шкур и искусственного меха      
Разница между стандартным сухим контейнером и контейнером с открытым верхом

 

Нажмите здесь, чтобы узнать ставку GST на товары и услуги

Список освобожденных от GST товаров и услуг

Найти номер HSN или код тарифа услуги для GST

Тарифный код услуги для GST

Регистрационные процедуры и формальности для получения GSTIN

Сколько цифр в GSTIN при регистрации налога на товары и услуги

Разрешена ли множественная регистрация в соответствии с налогом на товары и услуги (GSTIN)?

 Порядок получения Регистрационного номера ОГРН

Процедуры для получения регистрационного номера GST для фирм, освобожденных от ИТ.

 

Освобождение от налога на товары и услуги для малого и среднего бизнеса

GST, Изменение схемы состава

Решение собрания совета GST от 06 октября 2017 г.

Минимальная ставка GST на брикеты из биомассы

Пониженная ставка GST на части насосов с механическим приводом, предназначенных для перекачки воды

Пониженная ставка GST на детали, подходящие для скоростных дизельных двигателей мощностью не более 15 л.с.

Минимальная ставка GST на Real Zari

Минимальная ставка налога на товары и услуги на швейные нитки из химических штапельных волокон

Сниженная ставка налога на товары и услуги на все синтетические филаментные нити, такие как нейлон, полиэстер, акрил и т. д.

Пониженная ставка налога на товары и услуги на швейные нити из искусственных нитей, расфасованные или не расфасованные для розничной продажи

Минимальная ставка GST по долговым кредитным сертификатам

 

 

Состав и численность микробного сообщества после тысячелетнего потепления подводной вечной мерзлоты

Эллисон С. Д., Макгуайр К.Л. и Треседер К.К. и свойства почвы к утеплению через семь лет после бореального пожара, Почва биол.Biochem., 42, 1872–1878, https://doi.org/10.1016/j.soilbio.2010.07.011, 2010. 

Bischoff, J., Mangelsdorf, K., Gattinger, A., Schloter, M. , Курчатова, А. Н., Герцшух У. и Вагнер Д.: Реакция метаногенных архей на поздние Плейстоценовые и голоценовые климатические изменения в Сибирской Арктике, глобальные Биогеохим. Cy., 27, 305–317, https://doi.org/10.1029/2011GB004238, 2013. 

Biskaborn, B.K., Smith, S.L., Noetzli, J., Matthes, H., Vieira, G., Стрелецкий Д. А., Шенейх П., Романовский В.Е., Левкович А.Г., Абрамов А., Аллард М., Бойке Дж., Кейбл В.Л., Кристиансен Х.Х., Делалойе Р., Дикманн Б., Дроздов Д., Этцельмюллер Б., Гроссе Г., Гульельмин М., Ингеман-Нильсен Т., Исаксен К., Исикава М., Йоханссон, М., Йоханссон Х., Джу А., Каверин Д., Холодов А., Константинов П., Крегер Т., Ламбьель К., Ланкман Ж.-П., Луо Д., Малкова Г., Мейкледжон И., Москаленко Н., Олива М. , Филлипс М., Рамос М., Саннел, А.Б.К., Сергеев Д., Сейболд С., Скрябин П., Васильев А., Ву К., Йошикава К., Железняк М. и Лантуит Х.: Вечная мерзлота прогревается с мировой масштаб, нац. коммун., 10, 264, https://doi.org/10.1038/s41467-018-08240-4, 2019. 

Bolger, A.M., Lohse, M., and Usadel, B.: Trimmomatic: гибкий триммер для Данные последовательности Illumina, биоинформатика, 30, 2114–2120, https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btu170, 2014. 

Boschker, HTS и Middelburg, JJ: Стабильные изотопы и биомаркеры в микробная экология, FEMS Microbiol.экол., 40, 85–95, https://doi.org/10.1111/j.1574-6941.2002.tb00940.x, 2002. 

Босс, С. Б. и Фриден, К. Дж.: Концепции, инструменты и методы в атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой, Справочник Perkin-Elmer, Perkin-Elmer Corporation, США, 1989. Брамер, Л. М., Чу, Р. К., Тфайли, М. М., Янссон, Дж. К., и Стеген, Дж. К.: Ограничение рассеивания и термодинамические ограничения управляют пространственной структурой микробных сообществ вечной мерзлоты // ФЭМС Микробиол. Экол., 94, 1–48, https://doi.org/10.1101/265132, 2018. 

Браун Дж., Феррианс-младший О.Дж., Хегинботтом Дж.А. и Мельников Э.: Циркумарктическая карта условий вечной мерзлоты и подземного льда, US Geological Обзор, Вашингтон, округ Колумбия, 1997 г. 

Браун, Дж., Феррианс-младший, О.Дж., Хегинботтом, Дж.А., и Мельников, Е.С.: Циркумарктическая карта условий вечной мерзлоты и грунтовых льдов, Версия 2, Натл. Центр данных по снегу и льду, Боулдер, Колорадо, 2002., Биттингер К., Бушман Ф. Д., Костелло, Э.К., Фиерер, Н., Пенья, А.Г., Гудрич, Дж.К., Гордон, Дж. И., Хаттли Г. А, Келли С. Т., Найтс Д., Кениг Дж. Э., Лей Р. Э., Лозупон, К. А, Макдональд, Д., Мюгге, Б. Д., Пиррунг, М., Ридер, Дж., Севински Дж. Р., Тернбо П. Дж., Уолтерс В. А., Видманн Дж., Яцуненко Г. Т., Заневельд Дж. и Найт Р.: QIIME позволяет анализировать высокопроизводительные данные секвенирования сообщества, Nat. Методы, 7, 335–336, https://doi.org//10.1038/nmeth.f.303, 2010. 

Чобану, М.-К., Рабино, М. , Дроз, Л., Ревийон, С., Гильоне, Ж.-Ф., Денниелу, Б., Жорри, С.-Дж., Каллмейер, Ж., Этобло, Ж., Пинье П., Крассус П., Ванденабиле-Трамбуз О., Ложье Дж., Геган М., Годфруа А. и Ален К.: Седиментологический отпечаток микробных сообществ под морским дном в четвертичных отложениях западной части Средиземного моря , Biogeosciences, 9, 3491–3512, https://doi.org/10.5194/bg-9-3491-2012, 2012. 

Coolen, MJL and Orsi, WD: Транскрипционная реакция микробных сообщества в оттаивающих вечномерзлых почвах Аляски, Фронт.Микробиолог., 6, 1–14, https://doi.org/10.3389/fmicb.2015.00197, 2015. 

DeAngelis, K.M., Pold, G., Topçuoglu, B.D., van Diepen, L.T.a., Варни, Р. М., Бланшар, Дж. Л., Мелилло, Дж., и Фрей, С. Д.: Долгосрочные потепление лесных почв изменяет микробные сообщества в лесных почвах умеренного пояса, Передний. Microbiol., 6, 1–13, https://doi.org/10.3389/fmicb.2015.00104, 2015. 

Фиерер, Н. и Джексон, Р. Б.: Разнообразие и биогеография почвы бактериальные сообщества, P. Natl. акад. науч.США, 103, 626–631, https://doi.org/10.1073/pnas.0507535103, 2006. 

Фишер, Х., Ваннер, С.К., и Пуш, М.: Численность и продукция бактерий в речных отложениях в зависимости от биохимического состава взвеси органическое вещество (ВОВ), Биогеохимия, 61, 37–55, https://doi.org/10.1023/A:10202984, 2002. 

Фриц, М., Вонк, Дж. Э., и Лантуит, Х.: Обрушение арктических берегов, Nat. Клим. Change, 7, 6–7, https://doi.org/10.1038/nclimate3188, 2017. 

Галински, Э.A.: Осмоадаптация у бактерий, Adv. микроб. Физиол., 37, 273–328, https://doi.org/10.1016/S0065-2911(08)60148-4, 1995. 

Немецкий исследовательский центр наук о Земле: подводная вечная мерзлота, NCBI, доступно по адресу: https://www.ncbi. nlm.nih.gov/bioproject/PRJNA352907 (последний доступ: 24 сентября 2019 г.), 2016 г. 

Гиличинский Д., Вишнивецкая Т., Петрова М., Спирина Е., Мамыкин В., и Ривкина Е.: Бактерии вечной мерзлоты // Психрофилы: из биоразнообразия. к биотехнологии, под редакцией: Margesin, R. , 83–102, Springer-Verlag, Berlin Heidelberg, 2008. 

Гласс, Дж. Б., Ранджан, П., Кретц, С. Б., Нанн, Б. Л., Джонсон, А. М., Макманус, Дж., и Стюарт, Ф.Дж.: Адаптации атрибактерий к жизни в гидраты метана: горячие черты для холодной жизни, bioRxiv, 536078, https://doi.org/10.1101/536078, 2019. 

Грэм Д. Э., Валленштейн М. Д., Вишнивецкая Т. А., Уолдроп М. П., Фелпс Т.Дж., Пфиффнер С.М., Онстотт Т.С., Уайт Л.Г., Ривкина Э. М., Гиличинский Д. А., Элиас Д.А., МакКелпранг Р., Верберкмойс Н. К., Хеттих Р.Л., Вагнер Д., Вульшлегер С.Д. и Янссон Дж.К.: Микробы в тающей вечной мерзлоте: неизвестная переменная в уравнении изменения климата, ISME J., 6, 709–712, https://doi.org/10.1038/ismej.2011.163, 2012. 

Григорьев М. Н. Криоморфогенез и литодинамика прибрежно-шельфовой зоны. моря Восточной Сибири (Криоморфогенез и литодинамика Восточной прибрежная шельфовая зона Сибири), Российская академия наук, Сибирский Филиал, Якутск, 2008.

Гюнтер Ф., Овердуин П.П., Сандаков А. В., Гроссе Г. и Григорьев М.Н. Краткосрочная и долговременная термоэрозия льдистых многолетнемерзлых берегов в районе моря Лаптевых, Биогеонауки, 10, 4297–4318, https://doi.org/10.5194/bg-10-4297-2013, 2013. 

Хаммер, О., Харпер, Д. А. Т., и Райан, П. Д.: Палеонтологическая статистика. Программное обеспечение: Пакет для обучения и анализа данных, Palaeontol. Электрон., 4, 1–9, 2001. 

Хуббертен Х.В., Андреев А., Астахов В.И., Демидов И., Даудесвелл Дж. А., Хенриксен М., Хьорт К., Хоумарк-Нильсен М., Якобссон М., Кузьмина, С., Ларсен Э., Лункка Дж. П., Лисо А., Мангеруд Дж., Мёллер П., Саарнисто М., Ширрмейстер Л., Шер А. В., Зигерт К., Зигерт М. Дж., и Свендсен, Дж. И.: Приледниковый климат и окружающая среда в северных Евразия во время последнего оледенения // Четвертичная наука. Откр., 23, 1333–1357, https://doi.org/10.1016/j.quascirev.2003.12.012, 2004. 

Hultman, J., Waldrop, M. P., Mackelprang, R., Дэвид М.М., МакФарланд Дж., Блажевич С.Дж., Харден Дж., Турецкий М. Р., Макгуайр А.Д., Шах М.Б., VerBerkmoes, N.C., Lee, L.H., Mavrommatis, K., and Jansson, J.K.: Мультиомика многолетней мерзлоты, деятельного слоя и термокарстового болотного грунта микробиомы, Природа, 521, 208–212, https://doi.org/10.1038/nature14238, 2015. 

Инагаки, Ф. и Нилсон, К. Х.: Палеом: Письма с древней земли, в Аноксия водной толщи в прошлом и настоящем, Kluwer Academic Publishers, Дордрехт, 21–39, 2006 г. 

Инагаки, Ф., Хинрихс К.-У., Кубо Ю., Боулз М.В., Хойер В.Б., Хонг, В.-Л., Хосино Т., Идзири А., Имачи Х., Ито М., Канеко М., Левер М. А., Лин, Ю.-С., Мете, Б.А., Морита, С., Мороно, Ю., Таникава, В., Бихан, М., Боуден, С.А., Элверт, М., Гломбитца, К., Гросс, Д., Харрингтон, Г.Дж., Хори Т., Ли К., Лиммер Д., Лю С.-Х., Мураяма М., Окоучи Н., Оно, С., Парк, Ю.-С., Филлипс, С.К., Прието-Моллар, X., Пурки, М., Ридингер Н., Санада Ю., Соваж Дж., Снайдер Г., Сусилавати Р., Такано, Ю., Тасуми Э., Терада Т., Томару Х., Трембат-Райхерт Э., Ван Д. Т., и Ямада, Ю.: Изучение глубокой микробной жизни в угленосных отложениях до ∼2,5  км ниже дна океана, наука, 349, 420–424, https://doi. org/10.1126/science.aaa6882, 2015. 

МГЭИК в изменении климата, 2013 г.: Физическая научная основа. Вклад Рабочая группа I к Пятому оценочному докладу Межправительственной Группа по изменению климата, Кембриджский университет. Press, 1535, 2013. 

Янссон, Дж. К.и Таш, Н.: Микробная экология вечной мерзлоты, Nat. Rev. Microbiol., 12, 414–425, https://doi.org/10.1038/nrmicro3262, 2014. 

Jiang, H., Dong, H., Yu, B., Liu, X., Li, Y ., Цзи, С., и Чжан, CL: Микробная реакция на изменение солености в озере Чака, гиперсоленом озере на Тибетское плато, Окружающая среда. микробиол., 9, 2603–2621, https://doi.org/10.1111/j.1462-2920.2007.01377.x, 2007. 

Джонсон С.С., Хебсгаард М.Б., Кристенсен Т.Р., Мастепанов М., Нильсен Р., Мунк К., Бранд, Т., Гилберт, М.Т.П., Зубер, М.Т., Банс, М., Ронн Р., Гиличинский Д., Фрёзе Д. и Виллерслев Э.: Древние бактерии обнаруживают признаки репарации ДНК, P. Natl. акад. науч. США, 104, 14401–14405, https://doi.org/10.1073/pnas.0706787104, 2007.

Йоргенсен, Б. Б. и Маршалл, И. П. Г.: Медленная микробная жизнь в Морское дно, Энн. Rev. Mar. Sci., 8, 311–332, https://doi.org/10.1146/annurev-marine-010814-015535, 2016. 

Юнге К., Эйкен Х. и Деминг Дж. В.: Бактериальная активность при температуре от -2 до -20 градусов по Цельсию в арктических зимних морских льдах., заявл. Окружающая среда. микробиол., 70, 550–557, https://doi.org/10.1128/AEM.70.1.550-557.2004, 2004. 

Юнкер Р., Григорьев М. Н. и Каул Н.: Бесконтактная инфракрасная температура измерения в сухих скважинах вечной мерзлоты // J. Geophys. рез.-сол. шт., 113, B4102, https://doi.org/10.1029/2007JB004946, 2008. 

Каллмейер, Дж.: Обнаружение и количественная оценка микробных клеток в недрах Осадки, 1-е изд., Elsevier Inc., 2011. 

Каллмейер, Дж., Покалны, Р., Адхикари, Р. Р., Смит, округ Колумбия, и Д’Онд, С.: Глобальное распределение микробной численности и биомассы на дне морского дна осадок, P. Natl. акад. науч. США, 109, 16213–16216, https://doi. org/10.1073/pnas.1203849109, 2012. 

Катцов В.М., Каллен Э., Крупный рогатый скот Х., Кристенсен Дж., Дранге Х., Ханссен-Бауэр И., Йоханнесен Т., Кароль И., Райсанен Й., Свенссон Г., Чен Д., Поляков И. и Ринке А.: Изменение климата в будущем: Моделирование и сценарии для Арктики, в: Оценка воздействия на климат Арктики, 99–150, 2005 г.

Кнайер Ф., Овердуин П. П., Лангер М., Бойке Дж. и Григорьев М. Н.: Реконструкция температуры в скважине выявляет различия на поверхности в прошлом тренды температуры вечной мерзлоты в районе моря Лаптевых, Россия Арктика, арктос, 4, 1–17, https://doi.org/10.1007/s41063-018-0041-3, 2018. 

Кобабе С., Вагнер Д. и Пфайффер Э.-М. : Характеристика микробных Состав сообщества почвы сибирской тундры по флуоресценции in situ гибридизация, FEMS Microbiol. Экол., 50, 13–23, https://doi.org/10.1016/j.femsec.2004.05.003, 2004. 

Кох К., Кноблаух К. и Вагнер Д.: Состав метаногенного сообщества и анаэробный круговорот углерода в подводных многолетнемерзлых отложениях Сибирское море Лаптевых, окр. микробиол., 11, 657–668, https://doi.org/10.1111/j.1462-2920.2008.01836.x, 2009. 

Lantuit, H., Overduin, P.P., Couture, N., Wetterich, S., Aré, F., Аткинсон Д., Браун Дж., Черкашов Г., Дроздов Д., Дональд Форбс Л., Грейвс-Гейлорд, А., Григорьев, М., Хуббертен, Х.В., Джордан, Дж., Йоргенсон, Т., Эдегард Р. С., Огородов С., Поллард У. Х., Рахольд В., Седенко С., Соломон С., Стенхейзен Ф., Стрелецкая И., Васильев И. A.: База данных динамики арктических прибрежных районов: новая схема классификации и Статистика арктических берегов вечной мерзлоты, эстуар. Берег., 35, 383–400, https://doi.org/10.1007/s12237-010-9362-6, 2012. 

Ларри Лопес, К.М., Броучков, А., Накаяма, Х., Такаякаи, Ф., Федоров, А.Н., и Фукуда, М.: Эпигенетическое накопление солей и движение воды в деятельный слой центральной Якутии в Восточной Сибири // Гидрол.Процесс., 21, 103–109, https://doi.org/10.1002/hyp.6224, 2007. 

Лаубер, К.Л., Хамади, М., Найт, Р. и Фиерер, Н.: Пиросеквенирование на основе Оценка pH почвы как предиктор структуры почвенного бактериального сообщества по континентальной шкале, Appl. Окружающая среда. микробиол., 75, 5111–5120, https://doi.org/10.1128/aem.00335-09, 2009. 

Либнер С., Хардер Дж. и Вагнер Д.: Бактериальное разнообразие и сообщество структура в полигональных тундровых почвах о-ва Самойлова дельты Лены, Сибирь, междунар.Microbiol., 11, 195–202, https://doi.org/10.2436/20.1501.01.60, 2008. 

Liebner, S., Rublack, K., Stuehrmann, T., и Wagner, D.: Разнообразие аэробные метанотрофные бактерии в мерзлотном деятельном слое почвы р. Дельта Лены, Сибирь, Микроб. экол., 57, 25–35, https://doi.org/10.1007/s00248-008-9411-x, 2009. 

Либнер С., Ганцерт Л., Кисс А., Ян С., Вагнер Д. и Свеннинг, М. М.: Сдвиги в составе метаногенного сообщества и потоки метана вдоль деградация прерывистой вечной мерзлоты, Фронт.Микробиолог., 6, 1–10, https://doi.org/10.3389/fmicb.2015.00356, 2015. 

Линдстрем, Э. С. и Лангенхедер, С.: Местные и региональные факторы влияние на сборку бактериального сообщества, Environ. микробиол. Респ., 4, 1–9, https://doi. org/10.1111/j.1758-2229.2011.00257.x, 2012. 

Льобет-Бросса, Э., Росселло-Мора, Р., и Аманн, Р.: Микробное сообщество Состав отложений Ваттового моря по данным флуоресценции in situ Гибридизация, заявл. Окружающая среда. микробиол., 64, 2691–2696, 1998.

Ллойд, К.Г., Мэй, М.К., Кеворкян, Р.Т., и Стин, А.Д.: метаанализ методов количественной оценки показывает, что археи и бактерии имеют схожие обилие на дне моря, Appl. Окружающая среда. микробиол., 79, 7790–7799, https://doi.org/10.1128/AEM.02090-13, 2013. 

Луо, К., Родригес-Р., Л.М., Джонстон, Э.Р., Ву, Л., Ченг, Л., Сюэ , К., Ту, К., Дэн, Ю., Хэ, З., Ши, Дж. З., Юань, М. М., Шерри, Р. А., Ли, Д., Луо, Ю., Шур, Э. А. Г., Чейн, П., Тидже, Дж. М., Чжоу, Дж., а также Константинидис, К. Т.: Реакция микробного сообщества почвы на десятилетие потепление, выявленное сравнительной метагеномикой, Appl. Окружающая среда. микробиол., 80, 1777–1786, https://doi.org/10.1128/AEM.03712-13, 2014. 

Лира, К., Синкко, Х., Рантанен, М. , Паулин, Л., и Котилайнен, А. .: Осадок Бактериальные сообщества отражают историю морского бассейна, под редакцией: Slomp, C. P., PLoS One, 8, e54326, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0054326, 2013. 

Mackelprang, R., Waldrop, M.П., ДеАнджелис, К.М., Дэвид, М.М., Чаваррия, К.Л., Блажевич С.Дж., Рубин Э.М. и Янссон Дж.К.: Метагеномные Анализ микробного сообщества вечной мерзлоты показывает быструю реакцию на оттепель, Nature, 480, 368–371, https://doi.org/10.1038/nature10576, 2011. Дуглас, Т. А., и Уолдроп, М. П.: Стратегии микробного выживания в древности. вечная мерзлота: выводы из метагеномики, ISME J., 11, 2305–2318, https://дои.org/10.1038/ismej.2017.93, 2017. 

Мартин, М.: Cutadapt удаляет последовательности адаптеров из высокопроизводительных секвенирование читает, EMBnet. Журнал, 17, 10–12, https://doi.org/10.14806/ej.17.1.200, 2011. 

Мейер, Х., Шенике, Л., Ванд, У., Хуббертен, Х.В., и Фридрихсен, H.: Изотопные исследования водорода и кислорода в подземных льдах – Опыты с метод уравновешивания, изотопы окружающей среды. Стадия здоровья, 36, 133–149, https://doi.org/10.1080/10256010008032939, 2000. 

Мейер, Х., Деревягин А., Зигерт К., Ширмейстер Л., Хуббертен Х. В.: Реконструкция палеоклимата на Большом Ляховском острове, Северная Сибирь – Изотопы водорода и кислорода в жилах льда, Периглак вечной мерзлоты, 13, 91–105, https://doi.org/10.1002/ppp.416, 2002a.

Мейер, Х., Деревягин, А., Зигерт, К., и Хуббертен, Х.-В.: Палеоклиматические Исследования на Быковском полуострове, Северная Сибирь – изотопы водорода и кислорода in Ground Ice, Polarforschung, 70, 37–51, 2002b.

Мицшерлинг, Дж., Винкель М., Винтерфельд М., Хорн Ф., Ян С., Григорьев М.Н., Вагнер Д., Овердуин П.П., Либнер С.: развитие мерзлотных бактериальных сообществ в подводных условиях, Дж. Геофиз. Рез.-Биогео., 122, 1689–1704, https://doi.org/10.1002/2017JG003859, 2017. 

Мицшерлинг, Дж., Хорн, Ф., Винтерфельд, М., Малер, Л., Каллмейер, Дж., Овердуин, П.П., Винкель, М., Григорьев М.Н., Вагнер Д. и Либнер С.: Химический состав поровой воды, размеры зерен и температура отложений 4 кернов отложений из подводной вечной мерзлоты на мысе Мамонтов Клык, шельф моря Лаптевых, ПАНГЕЯ, https://doi. org/10.1594/PANGAEA.895292, 2018. 

Orsi, W.D.: Экология и эволюция микробов морского и подморского дна сообщества, нац. Rev. Microbiol., 16, 671–683, https://doi.org/10.1038/s41579-018-0046-8, 2018. 

Orsi, W.D., Coolen, MJL, Wuchter, C., He, L., More, K.D., Irigoien, X., Чуст Г., Джонсон С., Хемингуэй Дж. Д., Ли М., Гали В. и Джосан, Л.: Колебания климата, отраженные в микробиоме Аравийского моря отложения, наук. Респ., 7, 1–12, https://doi.org/10.1038/s41598-017-05590-9, 2017. 

Овердуин П.П.: СИСТЕМА российско-германского сотрудничества МОРЕ ЛАПТЕВЫХ: экспедиция БЕРЕГ I, в Экспедиции в Сибири 2005, под редакцией: Ширмейстер, Л., 1–40, Отчеты о полярных и морских исследованиях, 2007 г. 

Овердуин П.П., Рахольд В., Григорьев М.Н. Состояние подводного Вечная мерзлота Западно-Лаптевского взморья // Материалы Девятой Международная конференция по вечной мерзлоте, Фарибанкс, Аляска, 1345–1350 гг., 2008. 

Овердуин, П.П., Либнер С., Кноблаух К., Гюнтер Ф. , Веттерих С., Ширмейстер Л., Хуббертен Х.В. и Григорьев М.Н.: Окисление метана после деградации подводной вечной мерзлоты: измерения из центрального Скважина на шельфе моря Лаптевых // Журн. геофиз. Рез.-Биогео., 120, 965–978, https://doi.org/10.1002/2014JG002862, 2015. 

Паркс, Р. Дж., Сасс, Х., Крэгг, Б. А., Вебстер, Г., Руссель, Э. Г. П., и Вейтман, А. Дж.: Исследования прокариотических популяций и процессов в отложения морского дна – обновление в микробной жизни глубоководной биосферы, под редакцией: Калмейер, Дж.and Wagner, D., de Gruyter, Berlin, 1–27, 2014. 

Портнов А., Смит А. Дж., Минерт Дж., Черкашов Г., Рекант П., Семенов Г. П., Серов П. и Ванштейн Б.: Распад вечной мерзлоты на шельфе и Утечка метана с морского дна на глубине воды >20  м на Южно-Карском Морской шельф, Геофиз. Рез. Lett., 40, 3962–3967, https://doi.org/10.1002/grl.50735, 2013. 

Рахольд В., Большиянов Д. Ю., Григорьев М. Н., Хуббертен Х.-В., Юнкер, Р., Куницкий В.В., Меркер Ф., Овердуин П. , и Шнайдер, В.: Прибрежный арктическая подводная вечная мерзлота в переходный период, EOS T. Am. Геофиз. ООН., 88, 149–150, https://doi.org/10.1029/2007EO130001, 2007. 

Радуйкович Д., Вербрюгген Э., Сигурдссон Б.Д., Лебланс Н.И.В. Янссенс, И. А., Викка, С., и Уидон, Дж. Т.: Длительное воздействие не увеличить композиционный ответ почвенного микробного сообщества на потепление вдоль геотермические градиенты, FEMS Microbiol. Экол., 94, 1–10, https://doi.org/10.1093/femsec/fix174, 2018. 

Рат, К.М. и Роуск Дж.: Влияние соли на почвенный микробный разлагатель сообщество и их роль в круговороте органического углерода?: Обзор, Soil Biol. Biochem., 81, 108–123, https://doi.org/10.1016/j.soilbio.2014.11.001, 2015. 

Ритц, Д. Н. и Хейнс, Р. Дж.: Эффекты засоления, вызванного орошением, и содичность на микробную активность почвы // Soil Biol. Биохим., 35, 845–854, https://doi.org/10.1016/S0038-0717(03)00125-1, 2003. 

Риннан Р., Михельсен А., Баат Э. и Джонассон С. : Пятнадцать лет манипуляции с изменением климата изменяют микробные сообщества почвы в субарктике вересковая экосистема, Glob.Change Biol., 13, 28–39, https://doi.org/10.1111/j.1365-2486.2006.01263.x, 2007. Бактерии вечной мерзлоты ниже точки замерзания, Appl. Окружающая среда. микробиол., 66, 3230–3233, https://doi.org/10.1128/AEM.66.8.3230-3233.2000, 2000. 

Романовский Н.Н. и Хуббертен Х.В.: Результаты моделирования вечной мерзлоты низменности и шельф региона моря Лаптевых, Россия, Вечная мерзлота Периглак., 12, 191–202, https://doi.org/10.1002/ppp.387, 2001. 

Романовский Н.Н., Хуббертен Х.В., Гаврилов А.В., Тумской В.Е., и Холодов А. Л. Вечная мерзлота восточно-сибирского арктического шельфа и прибрежных низменности, четвертичная наука. Откр., 23, 1359–1369, https://doi.org/10.1016/j.quascirev.2003.12.014, 2004. 

Романовский Н.Н., Хуббертен Х.В., Гаврилов А.В., Елисеева А.А., и Типенко Г. С. Морская зона вечной мерзлоты и устойчивости газовых гидратов на шельф Восточно-Сибирских морей, Гео-Мар. Письма, 25, 167–182, https://дои.org/10.1007/s00367-004-0198-6, 2005. 

Роуск, Дж., Эльяагуби, Ф.К., Джонс, Д.Л., и Годболд, Д.Л.: Бактериальная соль толерантность не связана с засолением почвы в засушливой агроэкосистеме градиент солености, Soil Biol. Биохим., 43, 1881–1887, https://doi.org/10.1016/j.soilbio.2011.05.007, 2011. 

Руи, Дж., Ли, Дж., Ван, С., Ан, Дж., Лю, В., Лин, К. ., Ян, Ю., Хе, З. и Ли, X .: Реакция бактериальных сообществ на смоделированные изменения климата в Альпийские луговые почвы Цинхай-Тибетского плато // Заявл.Окружающая среда. микробиол., 81, 6070–6077, https://doi.org/10.1128/AEM.00557-15, 2015. 

Шимель, Дж., Бальзер, Т.С., и Валленштейн, М.: Реакция микробного стресса Физиология и ее значение для функционирования экосистем, Экология, 88, 1386–1394, https://doi.org/10.1890/06-0219, 2007. 

Schindlbacher, A., Rodler, A., Kuffner, M., Kitzler, B., Sessitsch, A., и Zechmeister-Boltenstern, S.: Экспериментальное воздействие тепла на микробы. сообщество горно-лесной почвы умеренного пояса, Soil Biol.Биохим., 43, 1417–1425, https://doi.org/10.1016/j.soilbio.2011.03.005, 2011. 

Шмидт, Т. М.: Множественность оперонов рибосомной РНК у прокариот Геномы, в: Bacterial Genomes, Springer US, Boston, MA, 221–229, 1998. Б., Горячкин С.В., Хагеманн С., Кухри П., Лафлер П.М., Ли Х., Мажитова Г., Нельсон Ф. Э., Ринке А., Романовский В. Э., Шикломанов Н., Тарнокай К., Веневский С., Фогель Дж.Г., Зимов С. А.: Уязвимость углерод вечной мерзлоты на изменение климата: последствия для глобального Cycle, Bioscience, 58, 701–714, https://doi.org/10.1641/B580807, 2008. Остеркамп, Т. Э.: Влияние таяния вечной мерзлоты на выброс старого углерода и чистый углеродный обмен из тундры, Nature, 459, 556–559, https://doi.org/10.1038/Nature08031, 2009. 

Сето, М. и Янагия, К.: Скорость выделения CO2 из почвы по отношению к температура и количество растворенного органического углерода, японский J.Экол., 33, оф. 199–205, 1983. 

Шахова Н. , Семилетов И., Салюк А., Юсупов В., Космач Д., и Густафссон, О.: Обширный выброс метана в атмосферу из Отложения Восточно-Сибирского арктического шельфа, Наука, 327, с. 1246–1250, https://doi.org/10.1126/science.1229223, 2010. 

Шахова Н., Семилетов И., Лейфер И., Сергиенко В., Салюк А., Космач, Д., Черных Д., Стаббс К., Никольский Д., Тумской В., Густафссон Э.: Вскипание и штормовой выброс метана из Восточно-Сибирской Арктический шельф, Нац.Geosci., 7, 64–70, https://doi.org/10.1038/ngeo2007, 2014. 

Skogland, T., Lomeland, S., and Goksøyr, J.: Респираторный взрыв после замораживание и оттаивание почвы: Опыты с почвенными бактериями, Soil Biol. Biochem., 20, 851–856, https://doi.org/10.1016/0038-0717(88)

-2, 1988. 

Смоландер, А. и Китунен, В.: Микробная активность и характеристики почвы растворенного органического углерода и азота по отношению к видам деревьев, Soil Biol. Biochem., 34, 651–660, https://doi.org/10.1016/S0038-0717(01)00227-9, 2002.

Спенсер, Р. Г. М., Манн, П. Дж., Диттмар, Т., Эглинтон, Т. И., Макинтайр, К., Холмс, Р. М., Зимок, Н., и Стаббинс, А.: Обнаружение сигнатуры таяние вечной мерзлоты на арктических реках // Геофиз. Рез. Письма, 42, 1–6, https://doi.org/10.1002/2015GL063498, 2015. 

Starnawski, P., Bataillon, T., Ettema, T.J.G., Jochum, L.M., Schreiber, Л., Чен, X., Левер, М. А., Полц, М. Ф., Йоргенсен, Б. Б., Шрамм, А., и Кьелдсен, К. У.: Сборка микробного сообщества и эволюция в донные отложения, P.Натл. акад. науч. США, 114, 2940–2945, https://doi.org/10.1073/pnas.16141, 2017. 

Стивен, Б., Левей, Р., Поллард, У. Х., и Уайт, Л. Г.: Microbial экология и биоразнообразие вечной мерзлоты, Extremophiles, 10, 259–267, https://doi.org/10.1007/s00792-006-0506-3, 2006. 

Stokstad, E.: Древняя ДНК, извлеченная из почвы, Science, 300, 407–407, https://doi.org/10.1126/science.300.5618.407a, 2003. 

Сан, Л., Пердью, Э. М., Мейер, Дж. Л., и Вейс, Дж.: Использование состав для прогнозирования биодоступности растворенного органического вещества в Река Джорджия, Лимнол. океаногр., 42, 714–721, https://doi.org/10.4319/lo.1997.42.4.0714, 1997. 

Свендсен Дж. И., Александерсон Х., Астахов В. И., Демидов И., Даудесвелл, Дж. А., Фундер С., Гатауллин В., Хенриксен М., Хьорт С., Хоумарк-Нильсен, М., Хуббертен, Х.В., Ингольфссон, О., Якобссон, М., Кьер, К. Х., Ларсен Э., Локранц Х., Лункка Дж. П., Лисо А., Мангеруд Дж., Матючков А., Мюррей А., Меллер П., Ниссен Ф., Никольская О., Поляк Л., Саарнисто М., Зигерт К., Зигерт М. Дж., Шпильхаген Р.Ф., и Штейн, Р.: История позднечетвертичного ледникового щита северной Евразии, четвертичный период. науч. Rev., 23, 1229–1271, https://doi.org/10.1016/j.quascirev.2003.12.008, 2004. 

Tarnocai, C., Canadell, J.G., Schuur, E.A.G., Kuhry, P., Mazhitova, G., и Зимов, С.: Запасы почвенного органического углерода в северной циркумполярной область вечной мерзлоты, Global Biogeochem. Су., 23, ГБ2023, https://doi.org/10.1029/2008gb003327, 2009. 

Таш, Н., Престат, Э., Ван, С., Ву, Ю., Ульрих, К., Книфси, Т. , Триндж, С.Г., Торн, М.С., Хаббард, С.С., и Янссон, Дж.К.: Пейзаж топография структурирует микробиом почвы в арктической полигональной тундре // Нац. Commun., 9, 777, https://doi.org/10.1038/s41467-018-03089-z, 2018. 

Тейлор, Дж. П., Уилсон, Б., Миллс, М. С., и Бернс, Р. Г.: Сравнение микробная численность и активность ферментов в поверхностных и подпочвенных слоях с использованием различных методов, Soil Biol. Биохим., 34, 387–401, https://doi.org/10.1016/S0038-0717(01)00199-7, 2002. 

Торнтон, Б.Ф., Гейбель М.С., Крилл П.М., Хамборг С. и Мёрт С. М.: Потоки метана из моря в атмосферу через сибирский шельф моря, геофиз. Рез. Lett., 43, 5869–5877, https://doi.org/10.1002/2016GL068977, 2016. 

Туорто С. Дж., Дариас П., МакГиннесс Л. Р., Паников Н., Чжан Т., Хэггблом, М.М., и Керхоф, Л.Дж.: Репликация бактериального генома в отрицательные температуры в вечной мерзлоте, ISME J., 8, 139–149, https://doi.org/10.1038/ismej.2013.140, 2014. 

Васильчук, Ю.К.: Реконструкция палеоклимата позднего Плейстоцен и голоцен в основе изотопных исследований подповерхностных льдов и воды криолитозоны, Водные ресурсы, 17, 640–647, 1991.

Веттер А., Вит А., Мангельсдорф К., Лерм С., Алави М., Вольфграмм М., Зайбт, А., и Вурдеманн, Х.: Биогеохимическая характеристика геотермальных Используемые подземные воды в Германии, в: Proceedings World Geothermal Congress, Bali, 1–6, 2010. 

Вуйлемин, А., Аризтеги, Д., Ливитт, П.Р., Бантинг Л. и научная группа ПАСАДО: Запись климата и диагенеза с помощью осадочной ДНК и ископаемых пигментов в лагуне Потрок Айке, Аргентина, Biogeosciences, 13, 2475–2492, https://doi.org/10.5194/ bg-13-2475-2016, 2016. 

Вюйлемин А., Аризтеги Д., Хорн Ф., Каллмейер Дж., Орси В.Д., Ансельметти Ф., Корбелла Х., Франкус П., Люке А., Майдана Н. И., Олендорф, К., Золичка, Б., Шабитц, Ф., и Вастегард, С.: Микробиология состав сообщества вдоль последовательности озерных отложений возрастом 50 000 лет, FEMS микробиол.Ecol., 94, 1–14, https://doi.org/10.1093/femsec/fiy029, 2018. 

Wagner, D., Gattinger, A., Embacher, A., Pfeiffer, E.-M., Шлотер, М., и Липски, А.: Метаногенная активность и биомасса в голоценовой вечной мерзлоте. месторождения дельты Лены, Сибирской Арктики и их значение для глобальный метановый бюджет, Глоб. Изменить биол., 13, 1089–1099, https://doi.org/10.1111/j.1365-2486.2007.01331.x, 2007. 

Уолдроп, М.П., ​​Викланд, К.П., Уайт, Р., Берхе, А.А., Харден, Дж.В., и Романовский, В.E.: Молекулярные исследования глобально значимого углерода pool: Углерод, защищенный вечной мерзлотой, в почвах Аляски, Glob. Изменить биол., 16, 2543–2554, https://doi.org/10.1111/j.1365-2486.2009.02141.x, 2010. 

Уокер, Т.В. Н.И. В., Вёбкен Д., Янссенс И. А., Сигурдссон Б. Д. и Рихтер А.: Чувствительность микробов к температуре и изменение биомассы объясняют содержание углерода в почве потери с согреванием, Nat. Клим. Чанг., 8, 885–889, https://doi.org/10.1038/s41558-018-0259-x, 2018. 

Ward, C.P. and Cory, R.M.: Химический состав растворенных органических вещества, дренирующие вечномерзлые грунты // Геохим. Космохим. Ак., 167, 63–79, https://doi.org/10.1016/j.gca.2015.07.001, 2015. 

Ватанабэ, К. и Мидзогути, М.: Количество незамерзшей воды в замерзших пористых среда, насыщенная раствором, холодная рег. науч. техн., 34, 103–110, https://doi.org/10.1016/S0165-232X(01)00063-5, 2002. 

Weedon, J.T., Kowalchuk, G.A., Aerts, R., ван Хал, Дж., ван Логтестейн, Р., Таш, Н., Релинг, В. Ф. М., и ван Бодегом, П. М.: Летнее потепление. ускоряет круговорот азота в субарктических торфяниках без изменения фермента пулы или структура микробного сообщества, Glob. Изменить биол., 18, 138–150, https://doi.org/10.1111/j.1365-2486.2011.02548.x, 2012. 

Уидон, Дж. Т., Ковальчук, Г. А., Аэртс, Р., Фрерикс, С., Релинг, В. Ф. М., и ван Бодегом, П.М.: Композиционная стабильность бактериального сообщество в чувствительном к климату субарктическом торфянике, Фронт.микробиол., 8, 1–11, https://doi.org/10.3389/fmicb.2017.00317, 2017. 

Вегнер К., Холеманн Я. А., Дмитренко И., Кириллов С., Кассенс И. H.: Сезонные колебания в динамике арктических отложений – данные за 1 год. записи в море Лаптевых (Сибирская Арктика), Global Planet. Смена, 48, 126–140, https://doi.org/10.1016/j.gloplacha.2004.12.009, 2005. 

Weiss, J.: Ionenchromographie, 3rd ed., Wiley-VHC, Weinheim, 2001. 

Wen, X., Yang, S., Horn, F., Winkel, M.и Вагнер, Д.: Global Biogeographic Анализ метаногенных архей указывает на то, что окружающая среда формирует сообщества Факторы природной среды, Фронт. микробиол., 8, 1339, https://doi.org/10.3389/fmicb.2017.01339, 2017. 

Вен, X., Унгер, В., Юрасински, Г., Кёбш, Ф., Хорн, Ф., Редер, Г., Сакс, T., Zak, D., Lischeid, G., Knorr, K.-H., Böttcher, ME, Winkel, M., Bodelier, PLE, и Liebner, S.: Преобладание метаногенов над метанотрофами в повторно заболоченных болотах, характеризующееся высокие выбросы метана, Biogeosciences, 15, 6519–6536, https://doi.org/10.5194/bg-15-6519-2018, 2018. 

Willerslev, E., Hansen, A.J., Rønn, R., Brand, T.B., Barnes, I., Wiuf, К., Гиличинский Д., Митчелл Д. и Купер А.: Длительное сохранение бактериальная ДНК, Curr. биол., 14, 13–14, https://doi.org/10. 1016/j.cub.2003.12.012, 2004. 

Винкель, М., Мицшерлинг, Дж., Овердуин, П.П., Хорн, Ф., Винтерфельд, М., Рийкерс Р., Григорьев М. Н., Кноблаух К., Мангельсдорф К., Вагнер Д., и Либнер, С.: Анаэробные метанотрофные сообщества процветают в глубоких подводная вечная мерзлота, наук.Респ., 8, 1–13, https://doi.org/10.1038/s41598-018-19505-9, 2018. 

Винтерфельд М., Ширмейстер Л., Григорьев М.Н., Куницкий В.В., Андреев А., Мюррей А. и Овердуин П. П.: Прибрежный ландшафт вечной мерзлоты развитие с позднего плейстоцена в западной части моря Лаптевых, Сибирь, Борей, 40, 697–713, https://doi.org/10.1111/j.1502-3885.2011.00203.x, 2011. 

Сюн, Дж., Сун, Х., Пэн, Ф., Чжан, Х. ., Сюэ, X., Гиббонс, С.М., Гилберт, Дж. А. и Чу Х.: Характеристика изменений в бактериальном сообществе почвы. структура в ответ на кратковременное нагревание, FEMS Microbiol.Экол., 89, с. 281–292, https://doi.org/10.1111/1574-6941.12289, 2014. 

Сюй, Г., Чен, Дж., Бернингер, Ф., Пумпанен, Дж., Бай, Дж. , Ю, Л. ., и Дуан, Б.: Лабильный, неподатливый, микробный углерод и азот и микробный состав сообщества на двух лесных возвышенностях Abies Faxoniana под повышенные температуры, Soil Biol. биохим., 91, 1–13, https://doi.org/10.1016/J.SOILBIO.2015.08.016, 2015. 

Yergeau, E., Hogues, H., Whyte, L.G., and Greer, C.W.: Функциональная потенциал высокогорной вечной мерзлоты Арктики, выявленный метагеномным секвенированием, количественная ПЦР и анализ микрочипов, ISME J., 4, 1206–1214, https://doi.org/10.1038/ismej.2010.41, 2010. 

Чжан, Дж., Коберт, К., Флури, Т., и Стаматакис, А.: ГРУША: быстрый и точное слияние парных концов Illumina, биоинформатика, 30, 614–620, https://doi.org/10.1093/bioinformatics/btt593, 2014. 

Чжан, К., Ши, Ю., Цзин, X., Хе, Дж. С., Сун, Р., Ян, Ю., Шейд, А. ., а также Чу, Х.: Влияние кратковременного потепления и изменения осадков на почву. микробные сообщества альпийских пастбищ Тибетского плато, Фронт.микробиол., 7, 1–11, https://doi.org/10. 3389/fmicb.2016.01032, 2016. 

Чжан Т., Барри Р. Г., Ноулз К., Линг Ф. и Армстронг Р. Л.: Распространение сезонно- и многолетнемерзлых грунтов в Северном Полушарие, в материалах 8-й Международной конференции по Вечная мерзлота, под редакцией А. Филлипса, Спрингман, Вечная мерзлота, Zürich, 1289–1294, 2003. 

Чжан, В., Паркер, К.М., Луо, Ю., Ван, С., Уоллес, Л.Л., и Ху, С.: Почва микробные реакции на экспериментальное нагревание и стрижку высокой травы прерия, Глоб.Изменить биол., 11, 266–277, https://doi.org/10.1111/j.1365-2486.2005.00902.x, 2005. 

Чжоу, Дж., Брунс, М.А., и Тидже, Дж.М.: Восстановление ДНК из почв различных состав, заявл. Окружающая среда. Microbiol., 62, 316–322, 1996. 

Зимов С.А., Шур Э.А., Чапин 3-й Ф.С.: Вечная мерзлота и глобальная углеродный баланс, Наука, 312, 1612–1613, https://doi.org/10.1126/science.1128908, 2006 г.

Зогг, Г. П., Зак, Д. Р., Рингельберг, Д. Б., Уайт, Д. К., Макдональд, Н.В., и Прегитцер, К.С.: Композиционные и функциональные сдвиги в микробной Сообщества из-за потепления почвы // Почвоведение.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.